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面议下列是产品的订购信息:
产品名称 | A9细胞,小鼠皮下结缔组织细胞规格 |
英文名称 | A9 cells, mice subcutaneous connective tissue cells |
货号 | EY-X64156 |
细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
培养操作步骤 :
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片*浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
地衣芽孢杆菌 Bacillus licheniformis苜蓿中华根瘤菌 Sinorhizobium meliloti
豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna
丁酸梭菌 Clostridium butylicumEBV-转化人淋巴细胞
白蛋白(ALB)天然蛋白 Native Albumin (ALB)
禽胆盐/Bile salt from poultryBR25克国产/进口
大鼠肾上腺嗜鉻细胞瘤细胞(未分化)苜蓿中华根瘤菌
圣堡罗沙门氏菌 Salmonella saintpaul人肾成纤维细胞*培养基
人肺大动脉内皮细胞*培养基100mL
大豆慢生根瘤菌
四硫磺酸钠煌绿增菌液 规格: 2X5支 用途: 含液2ml/支和煌绿1ml/支,2支添加于100mL(023030)中配成TTB
AC肉汤/通用培养肉汤/AC Broth用于常见微生物增菌培养和不含防腐剂样品的无菌试验250克国产/进口
A9细胞,小鼠皮下结缔组织细胞规格克仑特罗偶联牛血清白蛋白Clenbuterol/BSA 1mg
克仑特罗偶联血蓝蛋白Clenbuterol/KLH 1mg
畸胎瘤衍化生长因子抗原(表皮生长因子相关肽)N端CRIPTO 0.5mg
细胞角蛋白19多肽抗原Cytokeratin 19 0.5mg
人癌胚抗原抗原CEA(Carcinoembryonic Antigen )peptide 0.5mg
半胱胺酸蛋白酶蛋白-6(抗原)Caspase-6 (NT) 0.5mg
CD105/转化生长因子β受体抗原CD105 0.5mg
CD339/Jagged1抗原CD339/Jagged1 0.5mg
即刻早期基因(一种原癌基因)抗原C-fos 0.5mg
CD3 epsilon(抗原)CD3 epsilon 0.5mg
偶联牛血清白蛋白chloramphenicol/BSA 2mg
细胞培养方法:
1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;
③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清;
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基;
⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏:
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化;
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞;
④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。