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① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
产品名称:猪脑微血管周细胞
英文名称:Porcine Brain Microvascular Pericyte Cells
组织来源:大脑
产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶
猪脑微血管周分离自脑微血管;大脑分左右两个半球,大脑皮质(灰质)覆盖着每个大脑半球的大部分,它是神经元胞体集中的地方。内部则是由神经纤维或髓鞘构成的白质。每一个半球都有三个面,即外侧面(约占整个皮质面积的1/3)、内侧面和底面(占2/3的面积);半球表面有很多深浅不等的沟或裂,沟或裂之间的隆起叫回,它们大大增加了大脑的表面积;大脑外侧面重要的沟、裂有大脑外侧裂、顶枕裂和中央沟。由于三沟裂之界隔,使大脑皮质组分为额叶、顶叶、颞叶、枕叶四大部分。周细胞(pericyte)又称Rouget细胞和壁细胞,是一种包围全身毛细血管和静脉中内皮细胞的细胞,可以收缩。周细胞嵌入毛细血管内皮细胞的基膜中,通过物理接触和旁分泌信号与内皮细胞进行细胞通讯,监视和稳定内皮细胞的成熟过程。此外,周细胞还具有调控毛细血管血流量、细胞碎屑清除和吞噬以及血脑屏障渗透性的作用,其多功能性是目前研究的热点之一,所以对血管周细胞的生物学特征、标记物、细胞功能等的研究都为相关研究提供基础资料。周细胞产生手指状的外延以调控毛细血管的血流量。周细胞和内皮细胞之间共同拥有一个基膜,基膜上有多种细胞连接,包括多种整合素、神经钙黏素、纤连蛋白以及接合素。它还参与毛细血管直径的双向调控;毛细血管受损时,周细胞还可增殖,分化为内皮细胞和成纤维细胞。
实验室分离的猪脑微血管周采用-胶原酶联合消化法制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测
实验室分离的猪脑微血管周经α-SMA免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
包被条件:PLL(0.1mg/ml)
培养基:基础培养基,含FBS、EGF、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:成纤维细胞样
传代特性:可传3-5代左右;3代以内状态佳
消化液:0.25%
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
猪脑微血管周体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的佳培养状态。
取材→分离→培养和维持
1、取材
人和动物细胞的取材是原代细胞培养成功的首要条件,直接影响细胞的体外培养。
(1) 取材的基本要求
① 取材要注意新鲜和保鲜
② 应严格无菌
③ 防止机械损伤
④ 去除无用组织和避免干燥
⑤ 应注意组织类型、分化程度、年龄等
⑥ 作好记录
2、分离
人或动物体内(或胚胎组织)由于多种细胞结合紧密,不利于各个细胞在体外培养中生长繁殖,必须将现有的组织块充分散开,使细胞解离出来。
(1)悬浮细胞的分离方法
组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料,的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层,这样可根据需要收获目的细胞。
(2)实体组织材料的分离方法
对于实体组织材料,由于细胞间结合紧密,为了使组织中的细胞充分分散,形成细胞悬液,可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。
① 机械分散法
特点:简便、快速,但对组织机械损伤大,而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。
② 消化分离法
组织消化法是把组织剪切成较小团块(或糊状),应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动,使团块膨松,由块状变成絮状,此时再采用机械法,用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡,使细胞团块得以较充分的分散,制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液,接种培养后,细胞容易贴壁生长。
大鼠8-异构前列腺素F2α(8-epi-PGF2α)检测试剂盒 ,英文名: 8-epi-PGF2α ELISA Kit
Mouse maix metalloproteinase 10 (MMP-10) ELISA Kit 小鼠基质金属蛋白酶10(MMP-10)检测试剂盒
MouseCollageypeⅣ,ColⅣELISAKIT 小鼠Ⅳ型胶原(ColⅣ)检测试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforhumansimilaocDNAsequenceBC027382ELISAKit人类似cDNA顺序BC027382
通用型越橘叶枯黄病毒(BlueberryLeafScorchVirus;BLSV)试剂盒20次
ELISAKitFⅢ大鼠Ⅲ
SFTPD重组食蟹猴 SFTPD / SP-D / SFTP4 蛋白 Protein
Muc-1/CD227 粘蛋白-1/上皮膜 0.5mgMuc-1/CD227 粘蛋白-1/上皮膜
GRK6重组人 GRK6 / GPRK6 蛋白 (His & GST 标签) Protein
EEF1B2 Protein Human 重组人 EF1B / EEF1B2 蛋白
PTPRC Protein Mouse 重组小鼠 CD45 / PTPRC 蛋白 (Fc 标签)
Muc-1/CD227 粘蛋白-1/上皮膜 0.5mgMuc-1/CD227 粘蛋白-1/上皮膜
EEF1B2 Protein Human 重组人 EF1B / EEF1B2 蛋白
SFTPD重组食蟹猴 SFTPD / SP-D / SFTP4 蛋白 Protein
PTPRC Protein Mouse 重组小鼠 CD45 / PTPRC 蛋白 (Fc 标签)
GRK6重组人 GRK6 / GPRK6 蛋白 (His & GST 标签) Protein
小鼠解整合素样金属蛋白酶8(ADAM8)ELISA 试剂盒 96T/48T
Rat ai cardiolipin aibody IgG (ACA-IgG) ELISA Kit 大鼠抗心0脂抗体IgG(ACA-IgG)检测试剂盒
HumanovalbuminspecificIgE,OVAsIgEELISAKit 人卵清蛋白特异性IgE(OVAsIgE)检测试剂盒 96T/48T 进口分装
Humanai-BullousPemphigoid180aibody,BP180-Ab检测试剂盒人抗BP180抗体(BP180-Ab)检测试剂盒规格:96T/48T
植物核糖体分离试剂盒10次
Humanα-L-iduronidase,IDUAELISAKit人αL艾杜糖苷酸酶(IDUA)检测试剂盒规格:96T/48T
猪脑微血管周细胞小鼠凋亡相关因子检测试剂盒 小鼠凋亡相关因子试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠凋亡相关因子试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:检测试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠凋亡相关因子试剂盒、小鼠凋亡相关因子eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
小鼠第八因子相关抗原检测试剂盒 小鼠第八因子相关抗原试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠第八因子相关抗原试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:检测试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠第八因子相关抗原试剂盒、小鼠第八因子相关抗原eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
小鼠促卵泡素检测试剂盒 小鼠促卵泡素试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠促卵泡素试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:检测试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠促卵泡素试剂盒、小鼠促卵泡素eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
小鼠促甲状腺素释放激素检测试剂盒 小鼠促甲状腺素释放激素试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠促甲状腺素释放激素试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:检测试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠促甲状腺素释放激素试剂盒、小鼠促甲状腺素释放激素eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
T-25培养瓶充满培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
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