小鼠胚胎成纤维细胞培养方法
时间:2011-07-26 阅读:3619
上海劲马实验设备有限公司
:何
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细胞英文名称 MEF 细胞中文名 小鼠胚胎成纤维细胞
形态特性 成纤维细胞样 生长特性 贴壁生长
特征特性 取孕9天的615小鼠胚胎,去除脑、心脏等培养建立。该细胞可用作饲养层细胞,支持胚胎干细胞ES的生长并维持ES未分化的状态。当作为饲养层细胞时,MEF需经丝裂霉素C处理停止生长。建议作为ES细胞的饲养层时,MEF不要超过6代。
培养基 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)
血清 10%CS 其它因子 无
传代方法
细胞*汇合时,倒掉旧液,加入消化液(0.25%胰蛋白酶+0.03%EDTA)2ml消化,显微镜下观察细胞*脱离瓶壁分离成单个细胞后弃掉胰酶,加培养基混匀分瓶,T25瓶中加培养基至6-8ml,T75瓶加培养基至20ml,37℃,5%CO2孵箱培养。 P1
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS 支原体检测 阴性
同工酶 染色体
使用权限 A类 实物状态 可用