一、“鱼促肾上腺皮质激素Elisa试剂盒”详细参数
【检测方法】：酶联免疫法/酶免法(ELISA)
【产品性状】：96T/48T，盒装液体(两种统一规格)
【贮藏条件】：2-8°C
【产品有效期】：二年，我公司Elisa试剂盒均为批次，可放心购买。
【产品主要成分】：酶标板,试剂,标准品等。
【种属】马铃薯、鹿、羊、鸡、鸭、鱼、人、大鼠、小鼠、豚鼠、仓鼠、裸鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛等动植物。
【产品单价】（具体折扣），可免费代测，含税含运费。
【标本】血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等
注：标本必须为液体，不含沉淀。
二、“鱼促肾上腺皮质激素Elisa试剂盒”的四大特性
1．特异性强：不与其它细胞因子反应。
2．重复性好：板内、板间变异系数均小于10%。
3．稳定性高：实验效果很稳定。
4．超灵敏度：zui小的检测浓度小于1号标准品，稀释度和样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。
三、“试剂盒”具体操作方法
以双抗体夹心法为例展示：
1、双抗体夹心法检测抗原        
操作步骤如下：
1）将特异性抗体与固相载体结合，形成固相抗体。洗涤除去尚未结
合的抗体及一些杂质。
2）加入待测标本，保温反应。标本中的抗原与固相抗体结合，形成固相抗原抗体复合物。洗涤除去其他未结合物质。
3）加酶标抗体，保温反应。固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。*洗涤未结合的酶标抗体。此时固相载体上带有的酶量与标本中受检抗原的量相关。
4）加底物显色。固相上的酶催化底物成为有色产物。通过比色，测知标本中抗原的量。在临床检验中，此法适用于检验各种蛋白质等大分子抗原，例如 HBeAg、HBsAg、hCG 、AFP等。只要获得针对受检抗原的特异性抗体，就可用于包被固相载体和制备酶结合物而建立此法。如抗体的来源为抗血清，包被和酶标所使用的抗体分别取自不同种属的动物。如应用单克隆抗体，一般选择两个针对抗原上不同决定簇的单抗，分别用于包被固相载体和制备酶结合物。这种双位点夹心法具有很高的特异性，而且可以将受检标本和酶标抗体一起保温反应，作一步检测。
在一步法测定中，当标本中受检抗原的含量很高时，过量抗原分别和固相抗体及酶标抗体结合，而不再形成"夹心复合物"。类同于沉淀反应中抗原过剩的后带现象，此时反应后显色的吸光值（位于抗原过剩带上）与标准曲线（位于抗体过剩带上）某一抗原浓度的吸光值相同，如按常法测读，所得结果将低于实际的含量，这种现象被为钩状效应（hook effect），因为标准曲线到达高峰后呈钩状弯落。钩状效应严重时，反应甚至可不显色而出现假阴性结果。因此在使用一步法试剂测定标本中含量可异常增高的物质（例如血清中 HBsAg、AFP 和尿液 hCG 等）时，应注意可测范围的zui高值。用高亲和力的单克隆抗体制备此类试剂可削弱钩状效应。
四、样本处理五部曲
Elisa试剂盒样本前处理是酶联免疫试验中关键的一步，稍有不慎将导致实验满盘皆输，如何安全，快捷的处理样本，样本处理五部曲助您精彩实验。
1 均质
组织样本:肉、肝食品类切细，用绞肉机反复绞碎，混合均匀。
水产样本：去除样品的非食用部分，食用部分切细，用均质器均浆；原料表面较脏时,需适当用蒸馏水清洗。
蛋类：鲜蛋去壳，蛋黄和蛋白充分混匀。
水果、蔬菜类：先用水洗去泥沙，然后除去表面的水分，取食用部分。
2 振荡提取
 将提取溶剂加入到装有样品的具塞容器中，振荡，使提取溶剂与容器内的样品充分接触以深入到样本组织内部，提取待测组分。
2.1振荡方式：振荡器上进行上下、往返式振荡、手摇式上下振荡。
2.2 在组织样本中加入有机溶剂之间提取时，应边加边振荡，防止组织凝结成团，不利于提取。
3. 在用有机溶剂提取过程中，如果出现乳化现象，解决的方法有：①用细头轻轻的搅拌，破坏乳化后，再重复离心。②再加入适量的提取剂，重新振荡。注意离心后要保证样本的稀释倍数不变。
4 浓缩
 由于净化过程中引入的溶剂，可能会降低待测组分的浓度或者不适宜直接分析，需要去除全部有机溶剂。即试剂盒前处理步骤中把样本在60℃氮气下吹干，再用复溶液溶解干燥残留物。
浓缩方式：
 氮气吹干除杂、压缩空气吹干除杂。
注意：
1在吹干样本之前，用甲醇清洗针头，防止杂质干扰。
2在吹样本时，针头应在液面上空，避免与样本接触，防止产生交叉污染。
3样本吹干后应立即取下，避免吹的时间过长，影响zui终检测结果。
4不同的药物，吹干后样本的保质期不同，提倡待样本回到室温后立即复溶。
5 净化
 经过提取的待测组分中通常含有一些会干扰试剂盒中抗原抗体反应的杂质或者是含有与待测物结构相似的杂质。将待测组分与杂质分离的过程，我们称为试剂盒中样本的净化。在我们现有的试剂盒前处理方法中涉及到的zui常见的净化是：液液分配法。
 比如：用复溶液溶解干燥残留物之前先加入适量的正己烷，在加入正己烷和复溶液涡动后如果出现乳化现象，可以60℃水浴加热，至乳化现象消失或减弱后，加大离心转速进行离心。
五、判定结果计算
对于新入行不久，对ELISA的结果分析这块不太熟悉。客户的实验是通过人源的蛋白作为抗原，兔源多克隆抗体作为一抗（我们就是为了通过做ELISA来检测其效价），然后通过辣根过氧化物作为二抗及显色组分。实验做完了，但不知道怎么分析结果，例如标准曲线怎么做之类的。另外，还想问一下，有没有实用的软件可用来分析。对于客户的问题回答：

间接ELISA要是试剂盒，会有标准品的，把标准品按一定浓度梯度稀释一块儿做（一般有三个重复），zui后酶标仪或分光光度计比色，用软件（oringe）绘制标准曲线，的出公式，按公式将样品带入公式，
用于ELISA结果计算zui方便的是logit曲线。曲线的横坐标用标样各浓度（ng/ml 或其他单位）的自然对数表示，纵坐标用各浓度显色值的logit值表示。Logit值的计算方法如下：
                      B/B0         B
    Logit（B/B0）=ln———— =ln————
                     1-B/B0      B0-B
    其中B0是0ng/ml孔的显色值，B是其它浓度的显色值。