白介素3（IL-3）的诱生
时间：2011-01-08 阅读：580
IL-3亦称多克隆集落刺激因子，主要由活化的CD4+T细胞产生，一些T细胞杂交瘤或T淋巴瘤细胞系可在刺激或非刺激条件下产生IL-3。它的产生及活性与T细胞的分化、增殖密切相关。另外，IL-3还参与骨髓干细胞的分化和增殖。
（一）IL-3的诱生
1．ConA诱生脾细胞上清 用ConA刺激BOFl小鼠或Swiss小鼠脾细胞，收集其培养上清获取IL-3。操作步骤基本同用小鼠脾细胞诱生IL-2。
2．WEHI-3细胞培养上清的制备
（1）将WEHI-3细胞用Hanks液洗2次，用无血清培养液调整细胞浓度为2X106／mL，5％C02 37℃温箱中培养72h。
（2）将细胞悬液充分混匀后3 000r／min离心15min，收获上清即为含ID3的标本。
3．LBRM-33细胞培养上清的制备
（1）将LBRM-33细胞洗涤后，调整细胞浓度至1X106／mL。
（2）向上述细胞悬液中加入PI-IA（终浓度为1％）或ConA（终浓度20ug／mL）培养24h。
（3）将细胞悬液充分混匀，3 000r／min离心15rain，收获上清即为含IL-3的标本。