a．设备器材。大型高压灭菌器，自动拣皮器、半自动拣皮器或手工拣皮器，反应管木架与盘，20ml容量瓶与盘，过滤漏斗，各种量杯，各种容瓶，抗原与血清加注器，带乳头的毛细管，中性滤纸（中性石棉），大恒温箱等。

    b．药品与反应成分。

    0．85％生理盐水。

    浸皮液：氯化铵0．85g（盐皮不加氯化钠）6。0—8．0。*0．3—0．5g，蒸馏水100ml，pH6.0-8.0

    炭疽菌粉标准抗原、炭疽沉淀素血清、阴性血清，均由兽医生物药品厂供应。

    ②检样

a．被检皮张，应存放在库或的地方，须与检疫合格的皮张分开存放，严防污染。

    b．每批被检疫皮张按同产地、同种皮编成一个报检号，每100张或50张为一捆，或码成一垛，每批放在一处。

    c．在每张皮的腿部或腋下边缘部位，拣取样皮一块约1g，复检时仍在*次拣样的附近部位拣取样皮一块约20g，供作检疫材料。

    d．样皮应装入特制的布袋内（也可用其他容器），每袋应制成100个小格，并编成1—100个袋号（称百格袋），按其拣样顺序，将样皮依次装入小格袋内，皮张号、样皮号与袋格号应一致，逐个将样皮袋严密包装送往消毒室。

    e．皮垛的编号应与装样皮的布袋号相一致。盐皮、鲜皮及冻皮必须分开拣样，不得混掺。

    f．检样完毕的皮张，在未收到检疫结果通知单前，必须保持原状，不得分类、包装、加工和移动。

    g．检样人员应进行炭疽预防免疫和具有一定防疫知识，在工作前应穿好*，工作后，应充分消毒洗手，工作服须高压灭菌，要严格遵守防疫卫生制度。

h．每次检样时，兽医检疫人员应在现场负责指导监督。

   ③消毒

    a．收到样皮后，应按送检单内容进行登记。

    b．高压灭菌器用前应进行检查，然后将样皮袋放人高压灭菌器内，使压力升到103kPa （15lb）（121℃）保持30min。

    c．干皮与湿皮应分别消毒，‘如一次灭菌，干皮放上边，湿皮放下边，但湿皮、鲜皮和冻皮于灭菌前应在37～38℃恒温箱中放置48h，或放于室温3～4天，令其干燥后再进行灭菌。

    d．在操作中，应按检验炭疽病的防疫要求，不得污染周围环境和物品，用后的器械物品应及时消毒处理。

    ④被检皮张抗原的制备

    a．将清洁干燥的容瓶放在木盘上，排成5列（或者10列），每列10只，每盘50瓶（或100瓶），经灭菌后，修剪除去脂肪的样皮，按规定的质量，每2张装入一个容瓶内，  自左起第1排第l瓶放1—2号，第10瓶放19—20号，余类推，第5排第50瓶放99—100号皮样。容瓶位置不得混乱，第1瓶和第50瓶应做记号。

    b．如有缺皮或样皮混乱时，须将相应的容瓶翻扣起来，以免错号。

    巳装样皮的木盘编号与样皮袋号应一致，同时将编号卡片放在木盘外侧的号夹中，得遗失。

    d．按l：10的比例将浸皮液*生理盐水逐瓶加入20ml，在10～20~C的室温条件下浸泡16～24h，也可在8～14~C水浴中浸泡14—20h。

    e．以清洁无污染的容瓶与漏斗<每漏斗放以叠好的中性滤纸），每10个为l排，每盘5排计50个，其各个编号应与样皮木盘各个编号相一致。然后对号滤过，应使皮张抗原滤到澄清透明为止。

    f．将滤过透明之皮张抗原木盘编号卡片，放在木盘外侧的号夹中，应不得忘记和丢失。

    ⑤炭疽沉淀反应操作方法

    a．炭疽沉淀素血清应为黄色透明，无溶血现象。振荡浑浊的血清，滤过透明后，方能使用。冻过的血清应不用。开封后的血清，应在1—3日内用完。不同批号的血清不能混用。血清应保存在2～14~C冷暗处，保存期为2年。

    b．本反应应须在15—20~C以上的室温下进行。

    巳实施本反应前须按下列要求做好预备试验。

    炭疽沉淀素血清，对1：5000倍标准炭疽菌粉抗原在lmin内应是标准阳性反应。对已知阳性皮张抗原经15min应呈阳性反应。

炭疽沉淀素血清对已知阴性皮张抗原和生理盐水作用15rain应呈阴性反应。

   阴性血清对1：5000倍标准炭疽菌粉抗原和已知阴性皮张抗原经15min作用应呈阴性反应。

    d．将反应管按皮张抗原木盘内的编号顺序排好，以血清加注器（或带乳头毛细管）向

反应管内加注炭疽沉淀素血清o．1一o．2ml。然后以抗原加注器吸取等量的抗原，沿反应管壁徐徐加入，并记录加完后的时间，按加完的时间顺序排好待判。

    e．血清与皮张抗原的接触面界限清晰，明显可见，界限不清者应重做。血清与抗原加注器（或毛细管）应以生理盐水充分*洗涤后方可继续使用。

    f．如为盐皮抗原，应在炭疽沉淀素血清中加入4％化学纯氯化钠后，方能做血清反应。

    ⑥判定

    a．判定时，左手取出木盘中的装有10只反应管的木条，然后将反应管置于水槽中蘸水取出，放于眼睛平行位置，右手持黑色板衬于反应管的后面，在光线充足处进行观察与判定。须按下列标准记录结果。

    b．“+”：抗原与血清接触后，经15min，在两液接触面处出现致密清晰、明显的白环，为阴性反应。

    “土”：白环模糊、不明显者，为疑似反应。

    “一”：两液接触面清晰无白环者，为阴性反应。

    “O”：两液接触面界限不清，或其他原因不能判定者，为无结果。

    巳对可疑和无结果者，须重做1次。用过的一切用具，应充分洗涤，使之清洁无污，干燥后再用。

    ⑦复检

    a．病皮复检时，应单张检验。初检呈阳性和疑似的材料，须重新对同一浸泡瓶的两个皮张号拣样复检。复检时应使用2～3个血清效价与初检血清效价相近的不同批号的沉淀素血清来进行，同时用阳性血清做对照。复检的方法同初检。

    b．复检材料呈阳性反应时，则判为炭疽沉淀反应阳性。复检再呈疑似反应时，须按阳性皮张处理。

    c．经确定某号为阳性病皮后，应将病皮及上下相邻之污染皮准确地挑出，均作病皮处理，并盖病皮戳印，保管于库或地方隔离。病皮、污染皮未经消毒，不得做合格皮处理。

    d．皮张检疫结束后，应将结果填人检疫簿中，并开检验结果通知单。

    ⑧以有效的方法对病皮进行消毒，并经效果鉴定合格者，方能加工投产应用。