1．材料
（1） 免疫过的血清抗体滴度高的Balb/c鼠。
（2） 1640培养液
（3） 2.5％FCS－1640营养液
2．操作方法
（1） 拉颈或用CO2处死小白鼠。
（2） 将小鼠放于70％酒精中浸泡消毒，取出固定于板上，在无菌条件下取脾。
（3） 把脾放入5ml含有2.5％FCS的1640液中，冰浴下轻轻洗去脾上的红血球。
（4） 用镊子轻轻挤压脾，做成脾细胞悬液，用毛细管将悬液移入小试管中。
（5） 直立小试管3min，使大块的结缔组织下沉，把细胞悬液移入离心管中。
（6） 以2.5％FCS—1640充满离心管，并以400g离心7min～10min（与此同时应开始制备骨髓细胞）。
（7） 把沉淀用约10ml的新鲜培养液再悬浮。
（8） 重复⑹、⑺步骤。
（9） 计算细胞，以台盼兰染色用相差显微镜检查，活细胞数应高于80％为合格。