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48T人Apelin肽ELISA试剂盒*

时间:2013-08-19      阅读:299

一、ELISA试剂盒注意事项

1.  此试剂为体外检测试剂,效期内使用,试剂应视为传染物,不同总批号的试剂不能混用。

2. 使用前应将盒内各试剂取出。室温放置至少30分钟,

3. 浓缩洗涤液出现结晶后,请于37℃孵育15分钟。

4. 浓缩样品稀释液出现结晶后,请于37℃孵育15分钟

5. 若24小时内进行实验,标本可存放于2~8℃。不需及时实验,标本-20℃保存,避免反复冻融。

6. 在反复清洗微孔板,并扣干微孔中的残余液体,否则将降低度,造成吸光度偏离的假像。

7. 加样完毕后,应注意轻微摇动微孔反应条,以便使孔中的液体充分混匀。

8. 试剂盒保存于2~8℃,请勿冷冻,有效期请见盒内标示。

二、实验前准备

1.使用前应将盒内各试剂取出,室温放置至少30分钟。

2.准备各种实验仪器及材料,如微量移液器,吸头,医用蒸馏水等

3.浓缩洗液与医用蒸馏水1︰19倍稀释后成为应用洗涤液

4.浓缩样品稀释液与医用蒸馏水1︰4倍稀释成应用样品稀释液

5.用应用样品稀释液来稀释样品,按照1:100的体积比来稀释样品如10μl的样品加入到1ml的应用样品稀释液中,充分混匀待用。)

三、ELISA试剂盒操 作 步 骤

1.取出酶标板,设空白孔,依照次序对应分别加入100μl的标准品于空白微孔中(空白孔视为0号标准品,用医用蒸馏水替代)

2、分别标记样品编号,加入100μl的稀释样品于空白微孔中(不同的样本采用不同的吸头)。

3、将酶标板置于37℃温育30分钟;

4、将酶标板板取出,将其中的液体甩去,每个孔中全部加满应用洗涤液后,立即甩去液体;

5、每个孔中加满应用洗涤液后,轻微振摇酶标板30秒后将孔中的应用洗涤液甩去,在吸水纸上将酶标板拍干。

6、重复第5个步骤5次,在吸水纸上将酶标板拍干。

7、在标准品孔和样品孔中加入100μl的酶标偶合溶液。

8、将96孔板置于37℃温育30分钟。

9、将酶标板取出,将其中的液体甩去,每个孔中全部加满应用洗涤液后,立即甩去液体。

10、每个孔中再次加满洗涤应用液后,室温轻微振摇酶标板30秒后将孔中的应用洗涤液甩去,在吸水纸上将酶标板拍干。

11、重复第5个步骤5次,在吸水纸上将酶标板拍干。

12、在每个孔中加入底物A 50μl后立即加入底物B 50μl。轻轻振荡混匀。(A液、B液采用不同的吸头加样)

13、将酶标板置于37℃避光温育反应15分钟。

14、每个微孔中加入50μl的终止液,轻轻振荡混匀。

15、在酶标仪上,450nm处测定OD; 显色后,15分钟内进行测定。

16、根据制备的标准曲线,计算样本含量

四、ELISA试剂盒结 果 判 断

1. 仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值;

2、检测值范围:0-800pg/ml

3、敏感度:1.0pg/ml

DA2329-0.2ml Mad1(mitosis arrest deficiency 1) Mad1抗体 0.2ml
DA2330-0.2ml MAdCAM-1(Mucosal addressin cellular adhesion molecule-1) 粘膜血管定居因子抗体 0.2ml
DAR1149-0.1ml Rabbit anti-guinea pig IgG/APC 荧光素APC标记兔抗豚鼠IgG 0.1ml
DAR1150-0.1ml Rabbit anti-guinea pig IgM/APC 荧光素APC标记兔抗豚鼠IgM 0.1ml
DAR1151-0.1ml Rabbit anti-bov IgG/APC 荧光素APC标记兔抗牛IgG 0.1ml
DA2331-0.2ml FADD(Fas Associated Death Domain) Fas相关死亡结构域蛋白抗体 0.2ml
DA2332-0.2ml Mafa(avian)(V-maf musculoaponeurotic fibrosarcoma oncogene homolog A) v-maf 肌腱膜纤维肉瘤癌基因同源物A抗体 0.2ml
DA2333-0.2ml MAFbx/Fbx32/Atrogin-1 泛素蛋白连接酶抗体 0.2ml
DA2334-0.1ml MAG-a/b (Myelin associated glycoprotein; L/S -MAG;) 髓鞘相关糖蛋白a/b抗体 0.1ml
DA2334-0.2ml MAG-a/b (Myelin associated glycoprotein; L/S -MAG;) 髓鞘相关糖蛋白a/b抗体 0.2ml
DA2335-0.1ml MAG-a/L-MAG (Myelin associated glycoprotein) 髓鞘相关糖蛋白-a抗体 0.1ml
DA2335-0.2ml MAG-a/L-MAG (Myelin associated glycoprotein) 髓鞘相关糖蛋白-a抗体 0.2ml
DA2336-0.1ml MAGE-1/HLA-A1 protein (melanoma antigen family A member 1) 黑色素瘤相关抗原抗体 0.1ml

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