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实验规则:
1、底物是光敏感的,要在临用前现配
2、检测前,要打开酶标仪,使之稳定10分钟以上
3、底物有一定的毒性,终止液对皮肤有腐蚀性,应尽量避免接触
4、待检样品要澄清,否则会影响结果。
5、温浴时间应遵守试剂盒规定
6、应尽量做双孔实验,这样才能保证数据的准确性
7、对结果有疑问的样品要用其它方法进行确证
ELISA试剂盒正确选择合适的阴性对照:阴性对照的基本组成也应该尽量与检测样本的组成一致,好先行检测确定其中不含待检物质,检测成分有:酶标板、酶标记物、样品稀释液、浓缩洗涤液、底物液A、底物液B等。
人己糖激酶3(HK3)elisa试剂盒说明:
1.试剂盒保存:-20℃(较长时间不用时)2-8℃(频繁使用时)
2.有效期:6个月
3.浓洗涤液会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶
4.刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响
5.中、英文说明书可能会有不一致之处, 请以英文说明书为准。
科研试剂盒标本的稀释原则:首先通过文献检索的方式了解待测样本的大致含量,确定适当的稀释倍数。只有稀释至标准曲线的范围内,检测的结果才是准确的。稀释的过程中,应做好详细的记录。后计算浓度时,稀释了“N”倍,标本的浓度应再乘以“N”。
保质前使用:
1.确定本次检测所需的已包被抗体的酶标板孔数目,并增加1孔作为TMB空白显色孔。总数=样品数+9;做双份检测时×2。其余重包装好放如冰箱中。
2.将 2000pg/ml ,1000pg/ml ,500pg/ml,250pg/ml,125pg/ml,62.5pg/ml,31.2pg/ml 的标准品各0.1ml 依次加入一排 7 孔中,1ELISA试剂盒孔只加样品稀释液的作为零孔。对于人血清、体液、组织匀浆或细胞培养上清,直接加已用样品稀释液稀释的样品100μι。
3.酶标板加上盖,37℃反应90分钟。
4.反应后用自动洗板机吸去酶标板内的液体;或甩去酶标板内液体,再对着吸水纸拍几下。不洗。
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