―― 070040大肠埃希氏菌O157：H7生化鉴定盒(12种×10次)

  一)整套试剂及用品

  鉴定生化反应的12种试剂(表1)、10瓶0.85%无菌生理盐水、1瓶0.5 McFarland的浊度管、10支一次性吸管。

  二)生化管的使用方法

  开启西林瓶前，用75%酒精棉消毒西林瓶表面，在无菌条件下，按铝盖上的箭头方向打开铝盖，撕开铝盖，打开西林瓶胶塞(如图1)。所有的西林瓶在使用后均高压灭菌后方可弃去。

  三)出血性大肠杆菌O157：H7生化鉴定盒的详细使用方法

  出血性大肠杆菌O157：H7为革兰氏阴性杆菌，需氧或兼性厌氧，有周鞭毛，并有菌毛，不产生芽孢的杆菌。发酵乳糖，不发酵或迟缓发酵;氧化酶阴性;MUG阴性。

  从可疑肉汤培养物转接营养琼脂分离培养，将疑是肠杆菌科的新鲜菌苔置于已配备的无菌生理盐水中，与0.5 McFarland的浊度管比浊，将菌悬液制备成0.5McFarlａnd ( 约108cfu/mL )， 37℃培养18-24h，用吸管吸取2滴(约0.06mL)菌悬液加入每种微量生化管内。将已接种的西林瓶再套上胶塞，一般采用全加塞(如图2左两瓶所示)，特殊情况在下表注明采用半加塞(如图2右两瓶所示)，直立于内托的凹槽内(如图2)，或放置于合适的瓶架中，于35-37℃培养箱中培养，结果观察见表1。注意：如有特殊的接种方式、培养时间或培养方式，请详见每种生化鉴定管附带的使用说明。

  凡符合上述大肠杆菌O157：H7生化反应的纯菌落，经用抗E.coli O157：H7标准血清或EHEC O157：H7乳胶凝集试剂测试呈阳性结果，即可报告为该食品试样中检出肠出血性大肠杆菌O157：H7。