人肿瘤相关物质 （TAM）elisa试剂盒说明书进口*酶联免疫分析     
试剂盒使用说明书     
本试剂盒仅供研究使用。
检测范围：：： ：                                                         96T
3 IU/ml -100 IU/ml
 
使用目的：：： ：
本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中肿瘤相关物质（TAM）含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人肿瘤相关物质（TAM）水平。用纯化的人肿瘤
相关物质（TAM）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入肿瘤相关
物质（TAM），再与HRP标记的肿瘤相关物质（TAM）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体
复合物，经过*洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸
的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的肿瘤相关物质（TAM）呈正相关。用酶
标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人肿瘤相关物质（TAM）
浓度。  
试剂盒组成 
1  30倍浓缩洗涤液  20ml×1瓶  7  终止液  6ml×1瓶
2  酶标试剂  6ml×1瓶  8  标准品（200 IU/ml）  0.5ml×1瓶
3  酶标包被板  12孔×8条  9  标准品稀释液  1.5ml×1瓶
4  样品稀释液  6ml×1瓶  10  说明书  1份
5  显色剂A液  6ml×1瓶  11  封板膜  2张    
6  显色剂B液  6ml×1/瓶  12  密封袋  1 个 
 人肿瘤相关物质 （TAM）elisa试剂盒说明书进口*标本要求  
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能
马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤
1.  标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀
释。
100 IU/ml  5号标准品  150µl 的原倍标准品加入150µl标准品稀释液
50 IU/ml  4号标准品  150µl 的5号标准品加入150µl标准品稀释液
25 IU/ml    3号标准品  150µl 的4号标准品加入150µl标准品稀释液
12.5 IU/ml  2号标准品  150µl 的3号标准品加入150µl标准品稀释液
6.25 IU/ml  1号标准品  150µl 的2号标准品加入150µl标准品稀释液
 
 
2.  加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、
 
 
待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50µl，待测样品孔中先加样品稀释液40µl，
然后再加待测样品10µl（样品zui终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽
量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.  温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。      
4.  配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5.  洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此
重复5次，拍干。
6.  加酶：每孔加入酶标试剂50µl，空白孔除外。  
7.  温育：操作同3。
8.  洗涤：操作同5。
9.  显色：每孔先加入显色剂A50µl，再加入显色剂B50µl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色
10分钟.
10.  终止：每孔加终止液50µl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11.  测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。  测定应在加终止
液后15分钟以内进行。
操作程序总结：：： ：
 
 
计算
    以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的
OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标
 
 
准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，
即为样品的实际浓度。  
注意事项
1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未
用完，板条应装入密封袋中保存。
2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间
控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4． 请每次测定的同时做标准曲线，做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值
大于标准品孔*孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计
算时请zui后乘以总稀释倍数（×n×5）。
5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物请避光保存。
7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9．本试剂不同批号组分不得混用。
保存条件及有效期
1．试剂盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6个月 
  人肿瘤相关物质 （TAM）elisa试剂盒说明书进口*