上海科兴：标准品的制备

        上海科兴是一家专门从事生物技术相关产品研发和销售的综合性生物科学公司。公司专注于高品质生物资源的整合和研发，致力于以高水平的专业服务，积极推动中国生物产业和市场的发展。上海科兴拥有雄厚的实力、合理的价格和优良的服务，能够及时解决和满足客户的各方面的需求，与国内多家企业建立了良好的长期合作关系，在市场上树立了公司的良好信誉和形象。

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荧光定量 PCR 之定量分析——标准曲线的绘制

1. 定量定义 定量是用已知浓度的标准品绘制标准曲线来推算未知样品的量。 将标准品稀释至不同浓度，作为模板进行 PCR 反应。以标准品拷贝数的对数值为 横坐标，以测得的 CT 值为纵坐标，绘制标准曲线，对未知样品进行定量时，根据未知样品 的 CT 值，即可在标准曲线中得到样品的拷贝数。

2. 定量标准品 标准品的一些标准 * 必须用与扩增目的基因相同的引物进行扩增，并且扩增效率相同 * 标准品必须是经过准确定量的（我们通常用的是 ASP-3700 紫外光/可见光微量分光光度 计） * 标准品必须是标准化的（例如，同一化的细胞数） * 在每组实验时，必须用相同的阈值设定来确定 CT 值 标准品可以是含有目的基因的线性化的质粒 DNA，也可以是比扩增片段长的纯化 后的 PCR 产物，当然也可以是基因组 DNA，甚至 cDNA，但前提是所有的作为标准品的核 酸都必须保证稳定。

3. 标准品的制备一般一条标准曲线取四到五个点， 浓度范围要能覆盖样品的浓度区间， 以保证定量的准确性。