分离试剂盒编号：ISO-II
分离试剂盒适用：各种人和哺乳动物组织的骨骼肌细胞、平滑肌细胞、心肌细胞、肺组织细胞、软骨细胞及滑膜细胞的分离。
分离试剂盒规格：1
分离试剂盒价格：￥1980
分离试剂盒产地：中国，PriCells
分离试剂盒特征：不含有HIV、HBV、HCV、细菌、支原体、真菌、酵母；不含有内毒素；不含有苯；不含有血清。
生物安全级：1级。
运输条件：4oC。
储存条件：4oC，避光。
用途范围：只可用于科研。
原代细胞分离试剂盒II 产品说明书
一、主要适用
骨骼肌细胞、平滑肌细胞、心肌细胞、肺组织细胞、软骨细胞及滑膜细胞。
二、试剂盒组成
1、Buffer A： 100ml × 2 4℃ 保存
2、Buffer B： 50ml × 2 4℃ 保存
3、Buffer C 50ml × 1 4℃ 保存
4、Buffer D： 20ml × 1 4℃ 保存
5、Buffer E： 20ml × 1 4℃ 保存
6、消化液I： 2ml × 2 4℃ 保存
7、消化液II: 2ml × 1 4℃ 保存
三、使用方法
注意：使用前请认真阅读说明书，按说明书的要求对试剂进行妥善保存。
本试剂盒供用于5次组织的原代细胞分离，每次分离的组织约1g。
取消化液I 放入50ml Buffer B中，放4℃保存。用完后，再新鲜配制。消化液II放入50ml Buffer C中，放4℃保存。
1、取组织重约1g，放入无菌培养皿中，取1 × PBS（pH7.4）清洗组织，充分去除组织表面的血渍和其它异物。
2、将组织转入另一无菌的培养皿，切去多余组织如脂肪或坏死组织，用无菌刀 将组织切成1mm3小块。
3、用无菌弯头镊将组织块转入50ml的无菌离心管中，让组织块沉淀，吸去多余液体，加入10ml Buffer A，充分混匀，300g离心5分钟，弃上清，如此重复操作3次。
4、用10ml Buffer B重悬组织块，将组织块悬液转移至25cm2无菌培养瓶中， 放置CO2培养箱中，37℃培养24小时。
5用强力吹打使组织分散，将悬液移入15ml无菌离心管，500g离心5分钟， 弃上清。
6、取10ml Buffer C 悬浮组织块，置于37℃水浴中30分钟，每10分钟摇动一次，让组织块沉淀。
7、取上清放入50ml离心管中，加入1ml Buffer D, 终止反应。
8、重复步骤6、7两次。
9、将吸出全部上清进行离心，500g离心5分钟，弃上清。
10、取2ml Buffer E悬浮细胞，用血球计数板或电子记数仪计数细胞，并检测细胞活性。
11、悬浮细胞用相应的原代细胞培养基稀释，使每毫升培养基中含有1×106个细胞，接种培养瓶中，大约每平方厘米2×105个细胞。
12、每隔2-4天更换一次培养基（以pH变化为标准），观察细胞生长情况。
