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乙肝核心抗原(HBcAg)ELISA试剂盒操作说明

时间:2014-09-15      阅读:489

乙肝核心抗原(HBcAg)ELISA试剂盒操作说明

在长期的销售实践中,ELISA试剂盒实验形成了*的市场优势:产品齐全、价格合理、经营稳健、信息反馈及时、并能随时随地享受国外供应商zui直接、zui周到、zui完善的售后服务。

ELISA试剂盒操作步骤:
1.平衡:将试剂盒各组分从盒中取出,平衡至室温(18℃-25℃),微孔板开封后,余者即时以自封袋封存。
2.配液:浓缩洗涤液配制前充分摇匀(如有晶体应充分溶解),浓缩洗涤液和蒸馏水或去离子水按1:19稀释后使用。
3.编号:将微孔条固定于支架,按序编号。
4.稀释:将待测血清样品1:1000稀释。
5.加样:按顺序分别在相应孔加入100μl已稀释的待测血清样品或阴、阳性对照血清。
6.温育.置37℃温育20分钟。
7.洗涤:用洗涤液充分洗涤5次,洗涤完后扣干(每次均应保持30-60秒的浸泡时间)。
8.加抗原、酶:每孔中加入抗原(HBcAg)、酶标记抗体各50μl;轻拍混匀。
9.温育:置37℃温育40分钟。
10.洗涤:用洗涤液充分洗涤5次,洗涤完后扣干(每次均应保持30-60秒的浸泡时间)。
11.显色:每孔加底物A、B各50μl,轻拍混匀,室温暗置15分钟。
12.终止:每孔加终止液50μl,混匀。
13.测定:用酶标仪单波长450nm或双波长450nm/630nm测定各孔OD值(用单波长测定时需设空白对照一孔,30分钟内完成测定,并记录结果)。
ELISA试剂盒注意事项:
1.血清的稀释请使用10mmol/LPBS或生理盐水。不宜用蒸馏水稀释。
2.每板建议设阴、阳性对照血清各两孔,设空白对照时,不加样品、抗原及酶标记抗体,其余各步相同。
3.洗涤时各孔均须加满,防止孔口内有游离酶未能洗净。
4.加试剂前应将试剂瓶翻转数次,使液体混匀。如果滴加,滴加前应弃去1-2滴。滴加时瓶身应保持垂直,以使滴量准确。注意勿将试剂滴在孔壁上。
5.所有样品都应按传染源处理。
6.封口膜使用说明。
(1)微孔板拆封后,在取出当天所需的微孔条后,其余微孔条可以封口膜封存以避免受潮。在封存时,注意勿把封口膜粘贴到微孔条底部,以免影响其透光性。
(2)微孔板温育时,以封口膜覆盖孔口,可避免其它因素对实验带来的非预期的影响。
7.不同品名、不同批号的试剂不可混用,以免产生错误结果。
8.使用EDTA、*、*作为抗凝剂不影响实验结果。

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