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产品信息:
货号 | CS-X2752 | 组织来源 | 生长板组织 |
传代特性 | 可传5代左右;3代以内状态 | 培养基 | 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 |
细胞形态 | 梭形、多角形 | 生长特性 | 贴壁 |
培养条件 | 气相:空气,95%;CO2,5% | 换液频率 | 每3-4天换液一次 |
商品介绍:
产品名称:兔骺软骨细胞 3.产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶 4.细胞简介: 兔骺软骨细胞分离自骨骺生长板;骨骺生长板位于长骨两端骨骺和骨干之间的软骨组织,其中的骺软骨细胞可分裂、成熟、肥大,最终被骨组织所替换,对于长骨生长具有重要作用。幼稚的骺软骨细胞位于软骨组织的表层,单个分布、体积较小、呈椭圆形,长轴与软骨表面平行,越向深层的骺软骨细胞体积之间增大呈圆形,细胞核圆形或卵圆形,染色浅,细胞质弱嗜碱性,常见数量不一的脂滴。成熟的骺软骨细胞多2-8个成群分布于软骨陷窝内,这些骺软骨细胞由同一个母细胞分裂增殖而成,称为同源细胞群。电镜下,骺软骨细胞有突起和皱褶,细胞质内有大量的粗面内质网和发达的高尔基复合体及少量的线粒体。在组织切片中,骺软骨细胞收缩为不规则形,在软骨囊和细胞之间出现较大的腔隙。体外培养的骺软骨细胞对于研究其生理功能、药物作用以及各种致病因素作用下的病理生理改变具重要意义。 5.方法简介: 公司实验室分离的兔骺软骨细胞采用胶原酶-中性dan白酶联合消化并软骨细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。 6.质量检测: 公司实验室分离的兔骺软骨细胞经Ⅱ型胶原蛋白免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 7.培养信息: 培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 换液频率 每3-4天换液一次 生长特性 贴壁 细胞形态 梭形、多角形 传代特性 可传5代左右;3代以内状态 消化液 0.25%yi蛋白酶 培养条件 气相:空气,95%;CO2,5% |
细胞保存方法:
(一)细胞冻存
1. 配制含10%DMSO或甘油、10~20%小牛血清的冻存培养液;
2. 取对数生长期的细胞,去除旧培养液,用PBS清洗。
3. 去除PBS,加入适量(覆盖培养皿表面)把单层生长的细胞消化下来;
4. 离心1000rpm,5min;
5. 去除,加入适量配制好的冻存培养液,用吸管轻轻吹打使细胞均匀,计数,调节冻存液中细胞的最终密度为5×106/ml~1×107/ml;
6. 将细胞分装入冻存管中,每管1~1.5 ml;
7. 在冻存管上标明细胞的名称,冻存时间及操作者;
8. 冻存:标准的冻存程序为降温速率-1~-2℃/ min;当温度达-25℃以下时,可增至-5℃~-10℃/min;到-100℃时,则可迅速浸入液氮中。也可将装有细胞的冻存管放入-20℃冰箱2h ,然后放入-70℃冰箱中过夜,取出冻存管,移入液氮容器内。
注意事项:
1)、欲冷冻保存之细胞应在生长良好且存活率高之状态,约为80~90%致密度。冷冻前检测细胞是否仍保有其性质,应在冷冻保存前一至二日测试是否有抗体之产生。
2)、细胞在液氮中可长期冻存无,而不会影响细胞活力;在-70度可保存数月。
3)、注意冷冻保护剂之品质。DMSO应为试剂级等级,无菌且无色(以0. 22micron FGLP Telflon过滤或是直接购买无菌产品,如Sigma D-2650),以5~10 ml小体积分装,4 ℃避光保存,勿作多次解冻。Glycerol亦应为试剂级等级,以高压蒸汽灭菌后避光保存。在开启后一年内使用,因长期储存后对细胞会有毒性。本方法中先制备双倍冻存液,可避免DMSO直接加入时释放的热量对细胞的损伤。缓慢逐滴加入细胞悬液是使细胞逐步适应高渗,可降低细胞受损。DMSO可能引起部分白血病细胞株的分化,可换用10%甘油冻存。
公司正在出售的产品:
人食管上皮细胞 | 人母亲DPP同源物4(Smad 4)试剂盒ELISA |
人口腔粘膜成纤维细胞 | 人生长激su(HGH)试剂盒elisa |
人脉络膜微血管内皮细胞 | 人李斯特菌抗体(IgG)检测试剂盒 |
人尿道上皮细胞 | 鸡白介su9(IL-9)检测试剂盒 |
人脐带间充质干细胞 | 鹅螺旋体病PCR试剂盒 |
人气管上皮细胞 | 甲型流感()病毒RT-PCR试剂盒 |
人乳腺癌血管周细胞 | 变异链球菌PCR检测试剂盒 |
人肾动脉内皮细胞 | 皮诺卡菌PCR检测试剂盒 |
人食管平滑肌细胞 | 红色猪圆线虫PCR试剂盒 |
人胎盘羊膜细胞 | 石膏样小孢子菌PCR试剂盒 |
人胃癌组织源成纤维细胞 | 泰勒氏菌通用PCR试剂盒 |
人胰腺癌组织源细胞 | 狐狸源性成分(Vulpes)核suan检测试剂盒 |
人心肌细胞 | 兔骺软骨细胞猴免疫缺陷病毒PCR检测试剂盒 |
人脂肪细胞 | 泰泽隐孢子虫PCR检测试剂盒 |
人子宫颈上皮细胞 | 塔卡里伯病毒PCR检测试剂盒 |
操作步骤:
1)、冷冻前24-48小时更换半量或全量培养基,使细胞处于指数生长期。
2)、配制冷冻保存溶液(使用前配制):另取一离心管,加入培养基、血清,逐滴加入二甲基亚砜 (DMSO)至20%浓度,即制成双倍的冻存液,置于室温下待用。
3)、离心收集培养之细胞,用加血清的培养基重悬起细胞,取少量细胞悬浮液(约0. 1 ml)计数细胞浓度及冻前存活率。
4)、取与细胞悬液等量的冻存液,缓慢逐滴加入细胞悬液,并晃动试管,制成细胞冻存悬液(DMSO后浓度为5~10%),使细胞浓度为1~5×106cells/ ml,混合均匀,分装于已标示之冷冻保存管中,1~2 ml/vial,并取少量细胞悬浮液作污染检测。严密封口后,注明细胞名称、代数、日期。然后进行冻存。