细胞质绿色荧光染料

商品属性：

商品介绍：

乙酰氧甲基（AM）的酯衍生物及其螯合剂组成的荧光探针是进行多数活细胞研究时用到的广泛的化合物。修饰过的羧酸与AM 酯基团可以生成不带电荷的分子，具有细胞膜透性。但一进入细胞内，亲脂性的保护集团发生非特异性的水解，从而生成带电荷形式，滞留于胞内。通常情况下，AM 酯形式探针为无色无荧光状态，除非发生水解，这一属性对于储存来说，也是非常有用的自发水解的判断标准。

浓度：1 mg/mL in DMSO

储存：-20℃，避光，有效期6个月

步骤和注意事项：‌

准备实验环境：‌确保实验区域清洁，‌使用酒精清洁计数板和盖玻片，‌然后用吸水纸轻轻擦干。‌

细胞培养：‌

准备试管或培养皿、‌细胞培养基和待培养的细胞。‌

取出保存于低温下的细胞苗，‌并加入培养基中，‌摇晃混合均匀。‌

用移液管将细胞培养基和细胞种植在试管或培养皿中。‌

将试管或培养皿放置于恒温培养箱中，‌定期更换培养液。‌

细胞冻存与复苏：‌

细胞系的冻存是将生长较好的传代细胞悬浮在加有冷冻保护剂的溶液中，‌以一定的冷冻速率降至零下某一温度，‌并在此温度下对其长期保存的过程。‌

复苏则是将冻存的细胞系恢复到常温的过程，‌原则是“慢冻快融”，‌以较大限度地保存细胞活力。‌

细胞计数：‌

制备细胞悬液，‌使用消化单层培养细胞或收集悬浮培养细胞，‌制成单个细胞悬液。‌

在显微镜下，‌用10×物镜观察计数板四角大方格中的细胞数，‌细胞压中线时，‌只计左侧和上方者，‌不计右侧和下方者。‌

荧光显微镜使用：‌

使用荧光染料对细胞进行染色，‌并观察细胞所发出的荧光信号，‌以研究细胞结构和功能。‌

聚合酶链反应（‌PCR）‌：‌

准备PCR反应所需的DNA模板、‌引物、‌聚合酶和核苷酸。‌

按照PCR反应液配制表制备反应液。‌

在反应器中加入反应液，‌开始PCR反应。‌

PCR反应的成功与否，‌可以通过电泳、‌测序等方法进一步确认。‌

转染：‌

准备转染所需的载体DNA和细胞。‌

制备转染试剂，‌将DNA载体溶解于转染试剂中，‌与细胞混合均匀。‌

处理转染细胞，‌并进行下一步实验。‌

在操作过程中，‌应注意实验室安全规范，‌避免随意丢弃垃圾，‌及时登记购买耗材或试剂，‌保持实验环境的清洁和安全

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