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商品介绍:
本试剂盒为动物细胞死活检测提供了双色荧光染色方法。本试剂盒采用两种广泛常用的荧光探针,通过检测细胞内酯酶活性和质膜完整性两个方面反映细胞活力。本试剂盒适用于荧光显微镜、荧光多孔板、扫描仪、流式细胞仪以及其他荧光检测系统。本试剂盒可以应用于大多数的真核哺乳动物细胞,包括贴壁细胞核某些组织,但不适用与细菌、酵母。该方法更快捷安全且灵敏度更高。
商品属性:
货号 | 规格 | 货期 | 英文名称 |
CS-C6108 | 1000T | 1~3天 | Live & Dead Viability/Cytotoxicity Assay Kit for Animal Cells |
原理:在钙黄素AM 存在活细胞内时,其特点就是由于胞内的酯酶活性作用,由几乎无荧光、具有细胞膜透性的钙黄素AM生成具有强烈荧光信号的绿色荧光物质(Ex/Em:495nm/520nm)。而对于受损的细胞膜来说,碘化丙啶(PI)可以传过进入细胞,与核酸结合,荧光信号从而放大40 倍,产生一个明亮的红色荧光信号的死细胞(Ex/Em:530nm/620nm)。
步骤和注意事项:
准备实验环境:确保实验区域清洁,使用酒精清洁计数板和盖玻片,然后用吸水纸轻轻擦干。
细胞培养:
准备试管或培养皿、细胞培养基和待培养的细胞。
取出保存于低温下的细胞苗,并加入培养基中,摇晃混合均匀。
用移液管将细胞培养基和细胞种植在试管或培养皿中。
将试管或培养皿放置于恒温培养箱中,定期更换培养液。
细胞冻存与复苏:
细胞系的冻存是将生长较好的传代细胞悬浮在加有冷冻保护剂的溶液中,以一定的冷冻速率降至零下某一温度,并在此温度下对其长期保存的过程。
复苏则是将冻存的细胞系恢复到常温的过程,原则是“慢冻快融”,以较大限度地保存细胞活力。
细胞计数:
制备细胞悬液,使用消化单层培养细胞或收集悬浮培养细胞,制成单个细胞悬液。
在显微镜下,用10×物镜观察计数板四角大方格中的细胞数,细胞压中线时,只计左侧和上方者,不计右侧和下方者。
荧光显微镜使用:
使用荧光染料对细胞进行染色,并观察细胞所发出的荧光信号,以研究细胞结构和功能。
聚合酶链反应(PCR):
准备PCR反应所需的DNA模板、引物、聚合酶和核苷酸。
按照PCR反应液配制表制备反应液。
在反应器中加入反应液,开始PCR反应。
PCR反应的成功与否,可以通过电泳、测序等方法进一步确认。
转染:
准备转染所需的载体DNA和细胞。
制备转染试剂,将DNA载体溶解于转染试剂中,与细胞混合均匀。
处理转染细胞,并进行下一步实验。
在操作过程中,应注意实验室安全规范,避免随意丢弃垃圾,及时登记购买耗材或试剂,保持实验环境的清洁和安全
下列是公司正在出售的产品:
高保真KOD试剂盒 | ECF 人鼠嗜粒细胞趋化因子ELISA检测试剂盒 |
hERG抑制剂(Daurisoline) | Eotaxin 1/CCL11 人嗜粒细胞趋化蛋白Eotaxin 1ELISA检测试剂盒 |
MEK抑制剂(Cobimetinib hemifumarate) | Hsp-6 鸡热休克蛋白6ELISA检测试剂盒 |
cathepsin B抑制剂(CA-074) | EPO 人红细胞生成ELISA检测试剂盒 |
多靶点激酶抑制剂(AZD2932) | E-Selectin/CD62E 人E选择ELISA检测试剂盒 |
PIM抑制剂((1S,3R,5R)-PIM447 dihydrochloride) | FAS/CD95 人凋亡相关因子ELISA检测试剂盒 |
Bcl-2抑制剂((S)-Gossypol acetic acid) | IL-6 绵羊白介6ELISA检测试剂盒 |
RET激酶抑制剂(RET Kinase inhibitor 1) | ALCAM 人白细胞活化黏附因子ELISA检测试剂盒 |
PI3K抑制剂(CAL-130 Hydrochloride) | TRAIL-R3 猴子肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体3ELISA检测试剂盒 |
I型激酶抑制剂(VI 16832) | ACE 人血管紧张转化ELISA检测试剂盒 |
PI3K抑制剂(PI3K-IN-1) | IFN-α 猴α干扰ELISA检测试剂盒 |
LSD1抑制剂(GSK-LSD1 Dihydrochloride) | ANG 人血管生长ELISA检测试剂盒 |
突变型EGFR抑制剂(Mutated EGFR-IN-1) | ANG-1 人血管生成1ELISA检测试剂盒 |
Clk4抑制剂(ML167) | 细胞活力(活死细胞染色)检测试剂盒细胞凋亡OxLDL 兔子氧化低密度脂蛋白ELISA检测试剂盒 |
ULK1激动剂(LYN-1604 hydrochloride) | PEDF 兔色上皮衍生因子ELISA检测试剂盒 |