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上海市所在地
商品属性:
货号 | 规格 | 货期 | 英文名称 |
CS-C6045 | 100次|500次 | 1~3天 | Luminescent Cell Viability Assay Kit |
商品介绍:
本试剂盒是一种通过化学发光法测定细胞内ATP含量从而来定量检测活细胞数目的试剂盒。本试剂盒的性能和用途与公司的同类产品基本相同,对于相同的细胞样品本试剂盒的发光效果更强一些。
本试剂盒比常见的MTT、alamarBlue、Calcein-AM、WST-1、CCK-8等其它细胞活力测定方法更加简单快捷。只需把试剂盒提供的检测试剂与培养细胞等体积混合,反应10分钟后即可进行化学发光检测。无需洗涤细胞,也无需更换或去除培养液。并且化学发光非常稳定,在反应开始后的10分钟内无显著变化,30分钟内的下降不超过10%。
本试剂盒不仅适合少量样品的检测,也非常适合大量样品的高通量筛选检测。
本试剂盒线性范围广,检测灵敏度高。用96孔板进行检测时,本试剂盒在0-50,000个细胞/孔的细胞密度范围内有良好的检测效果,并且在仅有几百个细胞时仍有良好的线性关系。当细胞数量仅为50个/孔时,发光强度可达空白孔的5倍左右。
ATP,作为重要的能量分子,在细胞的各种生理、病理过程中起着重要作用。ATP是细胞新陈代谢的一个重要指标,也是具有代谢活性细胞的重要标志性分子,并和活细胞数目成良好的线性关系。因此,ATP含量能很好地反应活细胞的数目,即本试剂盒可以通过测定ATP含量来进行细胞计数或检测细胞活力。
本试剂盒通过ATP检测细胞活力的原理参考下图。借助ATP依赖的萤光素酶催化的萤光素发光反应,ATP可以通过测定化学发光来进行定量。由于ATP含量能很好地反映活细胞的数目,而ATP含量和发光强度成正比,这样就可以简单地通过化学发光强度来计算出细胞活力或细胞数目。
细胞活力检测试剂盒(化学发光法)检测ATP的原理图
对于96孔板,我们推荐使用100μl细胞培养液和100μl的检测试剂,总体积为200μl,此时本试剂盒可以进行100次检测。对于384孔板,我们推荐使用25μl细胞培养液和25μl的检测试剂,总体积为50μl,此时本试剂盒可以进行400次检测。也可以用其它体积的试剂进行检测,但细胞培养液和检测试剂体积的比例必须为1:1。
储存条件:室温,有效期2年。
步骤和注意事项:
准备实验环境:确保实验区域清洁,使用酒精清洁计数板和盖玻片,然后用吸水纸轻轻擦干。
细胞培养:
准备试管或培养皿、细胞培养基和待培养的细胞。
取出保存于低温下的细胞苗,并加入培养基中,摇晃混合均匀。
用移液管将细胞培养基和细胞种植在试管或培养皿中。
将试管或培养皿放置于恒温培养箱中,定期更换培养液。
细胞冻存与复苏:
细胞系的冻存是将生长较好的传代细胞悬浮在加有冷冻保护剂的溶液中,以一定的冷冻速率降至零下某一温度,并在此温度下对其长期保存的过程。
复苏则是将冻存的细胞系恢复到常温的过程,原则是“慢冻快融”,以较大限度地保存细胞活力。
细胞计数:
制备细胞悬液,使用消化单层培养细胞或收集悬浮培养细胞,制成单个细胞悬液。
在显微镜下,用10×物镜观察计数板四角大方格中的细胞数,细胞压中线时,只计左侧和上方者,不计右侧和下方者。
荧光显微镜使用:
使用荧光染料对细胞进行染色,并观察细胞所发出的荧光信号,以研究细胞结构和功能。
聚合酶链反应(PCR):
准备PCR反应所需的DNA模板、引物、聚合酶和核苷酸。
按照PCR反应液配制表制备反应液。
在反应器中加入反应液,开始PCR反应。
PCR反应的成功与否,可以通过电泳、测序等方法进一步确认。
转染:
准备转染所需的载体DNA和细胞。
制备转染试剂,将DNA载体溶解于转染试剂中,与细胞混合均匀。
处理转染细胞,并进行下一步实验。
在操作过程中,应注意实验室安全规范,避免随意丢弃垃圾,及时登记购买耗材或试剂,保持实验环境的清洁和安全
下列是公司正在出售的产品:
生物标记dUTP溶液(0.25mM) | VB12 植物维生B12ELISA检测试剂盒 |
CYP3A4/5抑制剂配体(Veledimex) | VK1 植物维生K1ELISA检测试剂盒 |
delta opioid受体激动剂([D-Ala2]leucine-enkephalin) | hs-CRP 鱼类超敏C反应蛋白ELISA检测试剂盒 |
胱天酶抑制剂(Biotin-VAD-FMK) | PHA 菜豆凝集ELISA检测试剂盒 |
IDO抑制剂(IDO-IN-6) | ZR 植物玉米核苷ELISA检测试剂盒 |
肉碱棕榈酰转移酶1抑制剂(Perhexiline maleate) | ABA 植物激脱落ELISA检测试剂盒 |
抑制剂(SW044248) | IL-8/CXCL8 犬白介8ELISA检测试剂盒 |
腺苷受体激动剂(NECA) | SJA 槐凝集ELISA检测试剂盒 |
CYP1A1抑制剂(TMS) | E-Selectin/CD62E 猴E选择ELISA检测试剂盒 |
GRK抑制剂(CCG215022) | WGA 麦胚凝集/凝集蛋白ELISA检测试剂盒 |
p18抑制剂(NSC23005 sodium) | IL-8/CXCL8 兔子白介8ELISA检测试剂盒 |
PARP-1抑制剂(NMS-P118) | GA 植物赤霉ELISA检测试剂盒 |
细胞增殖抑制剂(F16) | CIAP 牛的牛小肠碱性磷ELISA检测试剂盒 |
dipeptidyl peptidase II抑制剂 | 细胞活力检测试剂盒细胞凋亡与增殖VEGF 兔血管内皮细胞生长因子ELISA检测试剂盒 |
CYP1A酶抑制剂(Diosmetin) | ANG-Ⅱ 兔血管紧张ⅡELISA检测试剂盒 |