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产品信息:
货号 | CS-X2709 | 组织来源 | 肺组织 |
传代特性 | 可传3-5代左右 | 培养基 | 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 |
细胞形态 | 成纤维细胞样 | 生长特性 | 贴壁 |
培养条件 | 气相:空气,95%;CO2,5% | 换液频率 | 每2-3天换液一次 |
商品介绍:
产品名称:人肺微血管平滑肌 3.产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶 4.细胞简介: 人肺血管平滑肌细胞分离自肺组织;肺是机体的呼吸器官,位于胸腔,左右各一,覆盖于心之上。肺有分叶,左二右三,共五叶。肺经肺系(指气管、支气管等)与喉、鼻相连,故称喉为肺之门户,鼻为肺之外窍。肺血管平滑肌细胞原代分离培养3天后,可见细胞贴壁伸展,细胞形态大小不一,呈梭形、不规则形、三角形或扇形,核卵圆形、居中;2周后细胞汇合,多数细胞伸展呈长梭形,胞浆丰富,有分枝状突起,细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长,高低起伏;细胞密度低时,常交织成网状;密度高时,则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快,4-6天即可汇合,并保持上述形态学特征和生长特点。肺血管平滑肌细胞主要功能:①细胞表面表达介质(ICAM-1和VCAM-1)参与血管壁炎症反应;②是多数重要动脉疾病的靶细胞。肺血管平滑肌细胞与主要病生理变化:①平滑肌增生易致肺动脉高压;②先天性肺动脉狭窄;③肺动脉栓塞。血管平滑肌细胞的加速生长潜能是血管疾病进展的关键因素,研究表明血管平滑肌细胞表达的ICAM-1和VCAM-1能促进血管壁的炎症反应,并且与血管疾病的发展及稳定性有关。 5.方法简介: 公司实验室分离的人肺微血管平滑肌细胞采用混合胶原酶消化法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。 6.质量检测: 公司实验室分离的人肺微血管平滑肌细胞经α-SMA免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 7.培养信息: 培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 换液频率 每2-3天换液一次 生长特性 贴壁 细胞形态 成纤维细胞样 传代特性 可传3-5代左右 消化液 0.25%yi蛋白酶 培养条件 气相:空气,95%;CO2,5% |
细胞保存方法:
(一)细胞冻存
1. 配制含10%DMSO或甘油、10~20%小牛血清的冻存培养液;
2. 取对数生长期的细胞,去除旧培养液,用PBS清洗。
3. 去除PBS,加入适量(覆盖培养皿表面)把单层生长的细胞消化下来;
4. 离心1000rpm,5min;
5. 去除,加入适量配制好的冻存培养液,用吸管轻轻吹打使细胞均匀,计数,调节冻存液中细胞的最终密度为5×106/ml~1×107/ml;
6. 将细胞分装入冻存管中,每管1~1.5 ml;
7. 在冻存管上标明细胞的名称,冻存时间及操作者;
8. 冻存:标准的冻存程序为降温速率-1~-2℃/ min;当温度达-25℃以下时,可增至-5℃~-10℃/min;到-100℃时,则可迅速浸入液氮中。也可将装有细胞的冻存管放入-20℃冰箱2h ,然后放入-70℃冰箱中过夜,取出冻存管,移入液氮容器内。
注意事项:
1)、欲冷冻保存之细胞应在生长良好且存活率高之状态,约为80~90%致密度。冷冻前检测细胞是否仍保有其性质,应在冷冻保存前一至二日测试是否有抗体之产生。
2)、细胞在液氮中可长期冻存无,而不会影响细胞活力;在-70度可保存数月。
3)、注意冷冻保护剂之品质。DMSO应为试剂级等级,无菌且无色(以0. 22micron FGLP Telflon过滤或是直接购买无菌产品,如Sigma D-2650),以5~10 ml小体积分装,4 ℃避光保存,勿作多次解冻。Glycerol亦应为试剂级等级,以高压蒸汽灭菌后避光保存。在开启后一年内使用,因长期储存后对细胞会有毒性。本方法中先制备双倍冻存液,可避免DMSO直接加入时释放的热量对细胞的损伤。缓慢逐滴加入细胞悬液是使细胞逐步适应高渗,可降低细胞受损。DMSO可能引起部分白血病细胞株的分化,可换用10%甘油冻存。
公司正在出售的产品:
小鼠乳腺上皮细胞 | 人破伤风(Tetanus)抗体(IgG)试剂盒ELISA |
人肾动脉平滑肌细胞 | 人皮质酮/肾上腺酮(CORT)试剂盒ELISA |
人食管上皮细胞 | 人硫suan类肝su(HS/HPS)ELISA检测试剂盒 |
人退行性椎间盘髓核细胞 | 鸡17-酮类固醇(17-KS)ELISA检测试剂盒 |
人胃癌组织源细胞 | 山羊疱疹病毒1型PCR试剂盒 |
人心脏微血管内皮细胞 | 脑膜炎黄杆菌PCR试剂盒 |
人胰腺上皮细胞 | 小蛇菌属通用PCR检测试剂盒 |
人直肠癌组织源细胞 | 发酵支原体PCR检测试剂盒 |
人子宫内膜干细胞 | 海藻探针法PCR鉴定试剂盒 |
兔肺泡巨噬细胞 | 鼠呼肠孤病毒3型RT-PCR试剂盒 |
兔滑膜间充质干细胞 | 同禽疱疹病毒型鸡传染性喉气管炎病毒PCR检测试剂盒 |
兔乳腺上皮细胞 | 汉坦病毒Ⅱ型PCR检测试剂盒 |
兔脑静脉血管内皮细胞 | 人肺微血管平滑肌海水派琴虫PCR试剂盒 |
兔胰腺星状细胞 | 同牛疱疹病毒型牛疱疹乳头炎病毒PCR检测试剂盒 |
小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞 | 路邓葡萄球菌PCR检测试剂盒 |
操作步骤:
1)、冷冻前24-48小时更换半量或全量培养基,使细胞处于指数生长期。
2)、配制冷冻保存溶液(使用前配制):另取一离心管,加入培养基、血清,逐滴加入二甲基亚砜 (DMSO)至20%浓度,即制成双倍的冻存液,置于室温下待用。
3)、离心收集培养之细胞,用加血清的培养基重悬起细胞,取少量细胞悬浮液(约0. 1 ml)计数细胞浓度及冻前存活率。
4)、取与细胞悬液等量的冻存液,缓慢逐滴加入细胞悬液,并晃动试管,制成细胞冻存悬液(DMSO后浓度为5~10%),使细胞浓度为1~5×106cells/ ml,混合均匀,分装于已标示之冷冻保存管中,1~2 ml/vial,并取少量细胞悬浮液作污染检测。严密封口后,注明细胞名称、代数、日期。然后进行冻存。