大鼠过氧化氢酶(CAT)天然蛋白
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大鼠过氧化氢酶(CAT)天然蛋白

大鼠过氧化氢酶(CAT)天然蛋白

参考价: ¥1259~¥3959/盒

具体成交价以合同协议为准
2024-07-05 14:19:09
238
属性:
产品规格:10μg50μg200μg1mg5mg;分类:蛋白质;含量:98%;级别:试验试剂LR;英文名称:Native Catalase (CAT);物种:Rattus norvegicus (Rat,大鼠);型号:CS-D3197;性状:冻干粉;
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产品属性
产品规格
10μg50μg200μg1mg5mg
分类
蛋白质
含量
98%
级别
试验试剂LR
英文名称
Native Catalase (CAT)
物种
Rattus norvegicus (Rat,大鼠)
型号
CS-D3197
性状
冻干粉
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上海莼试生物技术有限公司

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产品简介

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详细介绍

大鼠过氧化氢酶(CAT)天然蛋白

大鼠过氧化氢酶(CAT)天然蛋白

种属

(Rat,大鼠)

型号

CS-D3197

纯度

> 97%

性状

冻干粉

用途

仅供科研实验

规格

10μg50μg200μg1mg5mg


大鼠过氧化氢酶(CAT)天然蛋白

产品名称:过氧化氢酶(CAT)天然蛋白

英文名称:Native Catalase (CAT)

酶与激酶

型号:CS-D3197

代谢通路

肝胆病学

物种:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)

来源:天然提取

宿主

亚细胞定位::分泌

预测分子量:59kDa

实际分子量:59kDa(差异分析请参阅说明书)

缓冲液成份:磷酸盐缓冲液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)

性状:冻干粉

纯度:> 97%

等电点:-

应用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

规格:10μg50μg200μg1mg5mg

 


大鼠过氧化氢酶(CAT)天然蛋白

大鼠过氧化氢酶(CAT)天然蛋白

1、组织蛋白提取

1)所需器材:制冰机、标记笔、两套1.5ml EP管(高温高压处理)、一个大冰盒、一个1.5ml EP管盒、手套、眼科剪(高温高压处理)、新鲜组织或保存于-80℃冰箱组织、保存于4℃冰箱的PBS(高温高压处理)、移液枪、吸头(高温高压处理)、两套研磨棒(高温高压处理)、掌上离心机、滤纸、三去污裂解液、苯甲基磺酸氟(PMSF,一种蛋白酶抑制剂,剧毒)、离心机、烧杯、2×SDS凝胶上样缓冲液、二硫苏糖醇(DTT)、震荡器、泡沫板。

大鼠过氧化氢酶(CAT)天然蛋白

a.制冰机制冰;

b.标记笔将两套EP管做好标记;

c.将大冰盒、EP管盒装上冰,一套标记笔做好标记的EP管放置于大冰盒中,另一套标记笔做好标记的EP管放置于EP管盒中,戴好手套,带上EP管盒、眼科剪剪取黄豆大小(约100mg)新鲜组织或保存于-80℃冰箱组织;

d.取出保存于4℃冰箱的PBS,往EP管中滴加1ml PBS,眼科剪剪碎组织(动作快),掌上离心,弃上清,再往EP管中滴加1ml PBS,研磨棒研磨,3000转离心10分钟,弃上清,滤纸尽可能吸干管口残留液体,估算EP管中沉淀物体积,以上步骤尽可能在冰上操作;

e.从4℃冰箱取出三去污裂解液,-20℃冰箱中取出PMSF置于大冰盒中,往EP管中滴加沉淀物3-5倍体积的三去污裂解液(一般为5倍),再加入PMSF(二者比例为94:6),研磨棒研磨(冰上充分裂解20-30分钟),以上步骤均需在进行;

f.离心机预冷,将充分裂解后的组织液4 ℃、10000转离心10分钟;

g.将烧杯用自来水洗净,倒入单蒸水,电炉上煮沸;

h.备好2×SDS凝胶加样缓冲液(存放于常温),取出保存于-20℃冰箱的DTT,置于大冰盒中,将离心后的上清液用移液枪定量吸至另一套EP管中(勿吸取下层沉淀物),按上清液:2×SDS:DTT =1: 0.8:0.2加入2×SDS 及DTT,掌上离心,然后小心将EP管插入泡沫板,投入已煮沸的烧杯中煮6-8分钟(电炉功率不要调太大,以免管盖爆开);

i. 将泡沫板用镊子取出,置大冰盒中冷却10分钟,掌上离心,再放入-20℃冰箱保存备用。

注意:裂解液也可酌情选用单去污裂解液或细胞裂解液等。

2、贴壁细胞蛋白提取(细胞蛋白含量一般约为1x10-9mg/细胞)

1)所需器材:制冰机、细胞刮刀、标记笔、两套1.5ml EP管(高温高压处理)、两个大冰盒、手套、长满细胞的培养瓶、保存于4℃冰箱的PBS、三去污裂解液、苯甲基磺酸氟(PMSF,一种蛋白酶抑制剂,剧毒)、移液枪、吸头(高温高压处理)、滤纸、离心机、烧杯、4×SDS凝胶上样缓冲液、二硫苏糖醇(DTT)、泡沫板。

大鼠过氧化氢酶(CAT)天然蛋白

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