大鼠基质金属蛋白酶13(MMP13)活性蛋白

产品名称：基质金属蛋白酶13(MMP13)活性蛋白

英文名称：Active Matrix Metalloproteinase 13 (MMP13)

CLG3; Collagenase 3

型号：CS-D3084

酶与激酶

肿瘤免疫

骨骼代谢

风湿病学

物种：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

缓冲液成份：20mM Tris, 150mM NaCl缓冲液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性状：冻干粉

纯度：> 97%

等电点：5.1

应用：Cellculture;ActivityAssays.

规格：10μg50μg200μg1mg5mg

蛋白方法/步骤：

一、其中碳氢被氧化为二氧化碳和水逸出，蛋白质中的氮转化为氨与硫酸结合生成硫酸氯在硫酸中，然后加碱蒸馏，使氨逸出，用硼酸吸收，再以硫酸或盐酸标准溶液滴定。根据酸的消耗量乘以换算系数为蛋白质含量。笔者根据多年来操作经验认为，
在检验过程中应注意如下三个环节。一、样品、试剂加入量的控制。
二、1．称取试样的多少取决于样品中蛋白质的高低。蛋白质中含氮量较恒定，通常是通过测定食品中氮的含量来确定蛋白质的含量。一般固体样品称取0．2-2．0g，半固体样品称取2—5g，液体样品吸取10-20ml。样品中含氮量低的可增加称样量。
三、2．硫酸的加入量，通常加20ml，但试样量如超过5g时，应按每克试样5ml的比例增加硫酸用量。否则试样消化不造成结果偏低。3．消泡剂的加入。含脂肪或糖较多的食品在消化时产生大量泡沫，溢出瓶外，造成氮的损失，所以消化前可加入少量消泡齐lj。如：液体石蜡、硅消泡剂等。
四、4．催化剂的加入量要适宜硫酸铜是的催化剂，效果好，价格便宜，环境污染小，而且是蒸馏加碱时的指示剂。硫酸钾可加快有机物的分解，使硫酸沸点从34．0℃提高到40．0℃以上，但加入量不能太大，否则温度过高会使铵盐分解而文——胡惠敏造成损失，除硫酸钾外硫酸钠也有同样作用。5．难消化的样品还可适当加入少量过氧化氢，次氯酸钠等氧化剂加速有机物氧化。

五、二、样品消化处理。1．样品一定要移入干燥的凯氏烧瓶中，否则样品易粘在瓶壁上不易消化。加硫酸时应将附在瓶壁上的粉末仔细洗至瓶中，使样品全部消化。还有在消化时注意转动凯氏烧瓶，利用冷凝酸液将附在瓶壁上的碳粒冲下促进消化。2．样品与试剂加入摇匀后瓶口应放一小漏斗，将瓶倾斜45。角斜至有小孔的石棉网上，小心加热，避免喷溅。待瓶内试样全部碳化，泡沫停止后，再加强火力，并保持瓶内液体微沸，至液体呈澄清透明的蓝绿色后再加热半小时，样品即消化。三、蒸馏过程中条件的控制。

蛋白实验注意事项：1、样本处理：

采样、存储和处理样本要规范，避免冻融循环。防止样本污染，保持样本的纯度。

2、样本分离和制备：

使用合适的分离方法，如SDS-PAGE或液相色谱。保持仪器和试剂的干净，防止污染。

3、样本标记和标准化：

选择合适的蛋白质标记方法，确保标记效率和稳定性。

4、质谱分析：

确保质谱仪和其他相关设备的校准和性能处于状态，并保持质谱分析条件的一致

5、数据处理和分析：

峰提取、质谱校准和蛋白质定量要仔细进行，使用专业工具。使用统计学方法分析数据，进行多重假设校正。

6、技术重复和质量控制：

进行技术重复，包括阳性和阴性对照组。确保实验的准确性和可重复性。

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