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本产品仅供科学实验研究使用! 不能用于临床或动物诊断!
英文名称:Acinetobacter spp.
型号:CSP916316
规格:50T
分类:探针法荧光定量PCR试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光。
有效期:一年
规格及成分:
PCR检测试剂盒流程示意图:
【结果分析条件设定】
u 基线(Baseline)设定:应选择该次实验指数扩增前所有样本荧光信号比较稳定的一段区域(所有样本荧光信号无较大波动),起始点(Start)应避开荧光采集起始阶段的信号波动,终止点(End)应比早出现指数扩增的样本Ct值减少1~3个循环,建议基线设为6~15。
u 阈值(Threshold)设定:将阈值线设定在刚好超过正常阴性质控品扩增曲线的高点。
【质控标准】
1. 阴性质控品的检测结果应为阴性,无指数扩增期,Ct=40或无Ct;
2. 阳性质控品的检测结果应为阳性,有明显的指数扩增期,Ct值应小于等于35;
3. 以上要求需在一次实验中同时满足,否则该次实验视为无效。
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实验操作:
1. 模板制备(样本制备区)
建议使用配套水生动物病害基因组 DNA/RNA 提取试剂盒系列产品,具体过程详见产品说明书。
2.添加模板(模板添加区,放置于冰盒中进行)
请于-20℃条件下保存,有效期 12 个月
取出所需测试数的已含有反应液 A-TSV-I 的 PCR 管,将试剂解冻,离心 30 秒,在管盖上标记管名(阴性对照管 NG、样品 XX、阳性对照管 PG)。打开管盖向各管管底分别加入 0.8μL B-I 及 0.2μL R-I,盖上阴性对照管管盖,其他各管分别沿管壁加入 2μL 模板,顺序为待测样品模板、PG-TSV-I,依次盖好各管管盖,离心 30 秒,立即进行扩增反应。
3. 扩增反应(扩增及产物分析区)
①恒温仪器 63℃条件下反应 60 min。待仪器升温至 63℃后,新建程序,设置实验名称及反应时间,将步骤 2中离心后的 PCR 反应管放入恒温荧光分子检测仪,点击开始检测。
②若使用荧光定量 PCR 仪,则荧光基团选择 FAM,淬灭基团选择 None,将 63℃ 15 s,63℃ 45 s 作为一个循环,于 63℃ 45 s 处收集荧光信号,60 个循环。
其他仪器请参照仪器说明书进行设置。