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细胞保存方法：
（一）细胞冻存
1. 配制含10%DMSO或甘油、10～20%小牛血清的冻存培养液；
2. 取对数生长期的细胞，去除旧培养液，用PBS清洗。
3. 去除PBS，加入适量（覆盖培养皿表面）把单层生长的细胞消化下来；
4. 离心1000rpm，5min；
5. 去除，加入适量配制好的冻存培养液，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，计数，调节冻存液中细胞的最终密度为5×106/ml～1×107/ml；
6. 将细胞分装入冻存管中，每管1～1.5 ml；
7. 在冻存管上标明细胞的名称，冻存时间及操作者；
8. 冻存：标准的冻存程序为降温速率-1～-2℃/ min；当温度达-25℃以下时，可增至-5℃～-10℃/min；到-100℃时，则可迅速浸入液氮中。也可将装有细胞的冻存管放入-20℃冰箱2h ，然后放入-70℃冰箱中过夜，取出冻存管，移入液氮容器内。
产品信息：
货号 | CS-X3319 | 组织来源 | 骨组织 |
传代特性 | 属于终末分化细胞；属于不增殖细胞群 | 培养基 | 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 |
细胞形态 | 梭形、多角形 | 生长特性 | 贴壁 |
培养条件 | 气相：空气，95%；CO2，5% | 换液频率 | 每2-3天换液一次 |
商品介绍：
产品名称：小鼠骨细胞 3.产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶 4.细胞简介： 小鼠骨细胞分离自骨组织；骨组织的细胞成分包括骨原细胞、成骨细胞、骨细胞和破骨细胞。只有骨细胞存在于骨组织内，其他三种细胞均位于骨组织的边缘。骨细胞（Osteocyte）是人体骨骼中主要的细胞成分。在成年人骨骼中，骨细胞占细胞总数量的90%～95%，大约是成骨细胞数量的20倍。骨细胞生长在骨骼内部的骨基质中。骨细胞的细胞体呈梭形或类圆形，位于基质构成的骨陷窝内。与神经细胞类似，每个骨细胞具有大量向外延伸的突触，而这些突触均位于由骨基质构成的骨小管结构中。通过这些突触，骨细胞能够与骨表面的细胞、周围其它的骨细胞进行“交流”。普遍认为，骨细胞起源于成骨细胞。在骨形成的终末阶段，成骨细胞将可能有3种不同的归宿：分化成为骨细胞、转移至骨表面成为暂不活动的成骨细胞、进入程序死亡过程（凋亡）。骨细胞为扁椭圆形多突起的细胞，核亦扁圆、染色深。胞质弱嗜碱性。电镜下，胞质内有少量溶酶体、线粒体和粗面内质网，高尔基复合体亦不发达。骨细胞夹在相邻两层骨板间或分散排列于骨板内。相邻骨细胞的突起之间有缝隙连接。在骨基质中，骨细胞胞体所占据的椭圆形小腔，称为骨陷窝，其突起所在的空间称骨小管。相邻的骨陷窝借骨小管彼此通连。骨陷窝和骨小管内均含有组织液，骨细胞从中获得养分。 5.方法简介： 公司实验室分离的小鼠骨细胞采用胶原酶消化法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。 6.质量检测： 公司实验室分离的小鼠骨细胞经骨钙素免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 7.培养信息： 培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 换液频率 每2-3天换液一次 生长特性 贴壁 细胞形态 梭形、多角形 传代特性 属于终末分化细胞；属于不增殖细胞群 消化液 0.25%yi蛋白酶 培养条件 气相：空气，95%；CO2，5% |
操作步骤：
1）、冷冻前24-48小时更换半量或全量培养基，使细胞处于指数生长期。
2）、配制冷冻保存溶液(使用前配制)：另取一离心管，加入培养基、血清，逐滴加入二甲基亚砜 (DMSO)至20%浓度，即制成双倍的冻存液，置于室温下待用。
3）、离心收集培养之细胞，用加血清的培养基重悬起细胞，取少量细胞悬浮液(约0. 1 ml)计数细胞浓度及冻前存活率。
4）、取与细胞悬液等量的冻存液，缓慢逐滴加入细胞悬液，并晃动试管，制成细胞冻存悬液(DMSO后浓度为5～10%)，使细胞浓度为1～5×106cells/ ml，混合均匀，分装于已标示之冷冻保存管中，1～2 ml/vial，并取少量细胞悬浮液作污染检测。严密封口后，注明细胞名称、代数、日期。然后进行冻存。
注意事项：
1）、欲冷冻保存之细胞应在生长良好且存活率高之状态，约为80～90%致密度。冷冻前检测细胞是否仍保有其性质，应在冷冻保存前一至二日测试是否有抗体之产生。
2）、细胞在液氮中可长期冻存无，而不会影响细胞活力;在-70度可保存数月。
3）、注意冷冻保护剂之品质。DMSO应为试剂级等级，无菌且无色(以0. 22micron FGLP Telflon过滤或是直接购买无菌产品，如Sigma D-2650)，以5～10 ml小体积分装，4 ℃避光保存，勿作多次解冻。Glycerol亦应为试剂级等级，以高压蒸汽灭菌后避光保存。在开启后一年内使用，因长期储存后对细胞会有毒性。本方法中先制备双倍冻存液，可避免DMSO直接加入时释放的热量对细胞的损伤。缓慢逐滴加入细胞悬液是使细胞逐步适应高渗，可降低细胞受损。DMSO可能引起部分白血病细胞株的分化，可换用10%甘油冻存。
公司正在出售的产品：
人脉络膜黑色素细胞 | 人登革热(DF)抗体(IgG)试剂盒ELISA |
小鼠牙周膜成纤维细胞 | 人毛细血管扩张性共济失调突变基因(ATM)试剂盒elisa |
大鼠脂肪细胞 | 人suan激meiR型同工mei(R-PK)检测试剂盒 |
人血管外膜成纤维细胞 | 人β半乳糖苷mei(βGAL) ELISA检测试剂盒 |
小鼠胰岛β细胞 | 气单胞菌通用PCR试剂盒 |
大鼠椎间盘纤维环细胞 | 猪囊尾蚴PCR检测试剂盒 |
小鼠真皮微血管内皮细胞 | 牡蛎疱疹病毒(OsHV)核suan检测试剂盒 |
大鼠滋养层干细胞 | 芥末PCR检测试剂盒 |
人脂肪间充质干细胞 | 马隐秘杆菌PCR试剂盒 |
小鼠脂肪干细胞 | 铅黄肠球菌PCR试剂盒 |
大鼠阴道上皮细胞 | 普氏立克次氏体PCR试剂盒 |
小鼠脂肪细胞 | 猫杯状病毒前病毒PCR试剂盒 |
人口腔上皮细胞 | 小鼠骨细胞马腺病毒PCR检测试剂盒 |
大鼠海绵体平滑肌细胞 | 葡萄孢菌PCR试剂盒 |
人胎盘间充质干细胞 | 肉毒杆菌A型（CB-A）核suan检测试剂盒 |
