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细胞冻存方法的改进

时间:2011-11-15      阅读:972

细胞冻存是细胞培养的重要环节之一。利用冻存技术将细胞置于-196℃液氮中低温保存,可以使细胞暂时脱离生长状态而将其细胞特性保存起来,这样在需要的时候再复苏细胞用于实验。而且适度地保存一定量的细胞,可以防止因正在培养的细胞被污染或其他意外事件而使细胞丢种,起到了细胞保种的作用。
冻存技术要点是慢冻,标准的冻存程序为降温速率-1~-2℃/ min;当温度达-25℃以下时,可增至-5℃~-10℃/min。我们常用的传统方法是将冻存管置于4℃30分钟--->-20℃60分钟--->-80℃过夜--->液氮罐。但是由于步骤较多,时间间隔较长,很容易遗忘。但是任何一个步骤的拖延都会严重影响细胞存活。而市面上程序冷冻仪又价格昂贵,必要性也不高,不是每个实验室都拥有的。
方法改进:我们考虑到泡沫塑料有很好的保温隔热效果,同时又注意到我们购买的BD公司的15ml离心管包装里的泡沫塑料孔径与冻存管相当。我们改进的冻存方法是:可将细胞冻存管放入泡沫支架中,再加盖一块同样的泡沫支架后,直接放入-80℃冰箱过夜后转移进液氮罐。该方法不但利用了废物利于环保,而且省时省心,非常便捷有效。
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