关于ELISA试剂盒的售前部分问题
时间:2018-02-01 阅读:259
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A:样本类:组织,血清,血浆,细胞,唾液,腹腔液,粪便,脑髓液,尿液,灌洗液。 B:关于细胞样本:a:关于细胞裂解方式:加RAPA细胞裂解液(其中加多少量,根据裂解液说明书参考,一般浓度越大,加的量越少),蛋白酶抑制剂:稳定蛋白的作用。 b:从收集*个样本开始到zui后一个样本结束,到做实验,样本在一个礼拜之内是保存在2-8℃,一个礼拜至一个月保存在-20℃,超过一个月-80℃(样本的保存问题适用于所有样本) c:技术做过破坏性验证:样本保存在2-8℃做出来的结果会更好,冻存住样本损失特别大。 B:关于血浆,血清 a:血清和血浆的区别在于多了一个纤维蛋白原。 b;血浆加抗凝剂离心,抗凝剂对实验无影响。 c;血清有两种收集两种方法:①:加促凝剂,离心。②:自然凝固(不能低于两个小时),离心。 C:组织 a;组织样本收集三原则:①:组织样本保持鲜重(不能用甲醛固定),②:重量不能低于50mg.③:匀浆的比例选取10%(当样本匀浆比例大,20%,30%匀浆会不充分。当样本浓度低时,可能会低于ELISA试剂盒检测的下限值。) b;PBS:0.01mol,PH在4000r/min,不能超过5000r,蛋白在高速环境下易降解。 D:唾液:两种收集方法,一种是虹吸管直接收集,另外一种是用镊子夹棉球蘸取。 E:粪便样本:性质状态对实验结果有很大影响。 F:尿液:1:1(磷酸盐缓冲液)的比例保存。 G:关于种类的区分:例如斑马鱼和草鱼,都可以用鱼的指标(利用同源性相关) H:关于气体:NO,乙烯,乙炔。用ELISA试剂盒检测原理:气体分子会与机体结合蛋白,有蛋白就可以测。 I:定量:直接测定样本的阴阳性(一般都是病毒类) 定量:测定样本的OD值。 活性;一般是检测酶活:含量和活性成正比关系。 J:双抗夹心法:操作简单,灵敏性差。 间接法:试剂盒灵敏度高,操作繁琐。(一般RD的试剂盒,都是用间接法,RD一般做细胞因子。) K: 批间值:不能超过15%,批类值:不能超过10%。进口试剂盒批间批类差小,重复性好。进口国产试剂盒都符合国家规定。 L:试剂盒做平行,可以验证试剂盒重复性好,有效的测定有效值的取舍,三平行做出的数值标准差大于二平行。 M:出现边缘效应:出现假阴假阳,酶标板在经过酶标仪会进行光的发散所引起的。