人结肠癌转基因细胞购买细胞注意事项：

1.收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和我们。

2.仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等，确保细胞培养条件*。若由于培养条件不*而导致细胞出现问题，责任由客户自行承担。

3.用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养过夜，隔天再取出观察。此时多数细胞均会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常，请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活力，请拍下照片及时和我们

4.静置细胞贴壁后，请将细胞瓶内的培养基倒出，留 6~8mL维持细胞正常培养，待细胞汇合度 90%左右时正常传代。

5.请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞传代时可以一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件。

6.建议客户收到细胞后前 3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态,便于和技术部沟通交流。

细胞名称：人结肠癌转基因细胞
培养条件：MEM培养基(GIBCO)+10%FBS
英文简称：RKO-AS45-1
种属：人

1.取出细胞瓶,75%酒精消毒后拆下封口膜，放入37℃，5%CO2培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。

2.待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
 
3.细胞传代：吸出细胞瓶中的培养基，用 PBS清洗细胞一次。

4.加入0.125%胰蛋白酶消化液约 1mL至培养瓶中，37℃消化   3min左右；显微镜下
观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入*培养液终止消化。

5.用吸管轻轻吹打混匀，按 1:2或  1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的
*培养基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2细胞培养箱中培养。

6.待细胞*贴壁后，培养观察，每隔 2-3天更换新鲜的*培养基。

由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们，告知细胞的具体情况，以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。

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