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面议货号:WT-E6869 【小鼠心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA试剂盒说明书】ELISA试剂盒基本操作注意事项
加样:
在ELISA中一般有3次加样步聚,即加标本,加酶结合物,加底物。加样时应将所加物加在LEISA板孔的底部,避免加在孔壁上部,并注意不可溅出,不可产生气泡。
保温
抗原抗体完成反应的保温过程称为温育(incubation)。
ELISA属固相免疫测定,抗原、抗体的结合只在固相表面上发生。为什么ELISA反应总是需要一定时间的温育?
温育常采用的温度有43℃、37℃、室温和4℃(冰箱温度)等。37℃是实验室中常用的保温温度,也是大多数抗原抗体结合的合适温度。【小鼠心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA试剂盒说明书】
保温方式:ELISA仪器附有特制的电热块,水浴。
若用保温箱:ELISA板放在湿盒内,在盒底垫湿的纱布,zui后将ELISA板放在湿纱布上。反应板均不宜叠放,以保证各板的温度都能迅速平衡。
室温温育的反应,操作时的室温应严格限制在规定的范围内,标准室温温度是指20-25℃,但具体操作时可根据说明书的要求控制温育。应注意温育的温度和时间应按规定力求准确。为保证这一点,一个人操作时,一次不宜多于两块板同时测定。
洗涤
洗涤在ELISA过程中虽不是一个反应步骤,但却也决定着实验的成败。
ELSIA洗涤:达到分离游离的和结合的酶标记物的目的。【小鼠心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA试剂盒说明书】
清除残留在板孔中游离的物质,以及非特异性地吸附的干扰物质。聚苯乙烯等塑料对蛋白质的吸附是普遍性的,而在洗涤时又应把这种非特异性吸附的干扰物质洗涤下来。
可以说在ELISA操作中,洗涤是zui主要的关键技术。
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【小鼠心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA试剂盒说明书】