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面议货号:WT-E5285【犬乙型肝炎表面抗原(HBsAg)ELISA试剂盒原理】ELISA是一种免疫测定(immunoassay,IA) 。基础:抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,由此进行定性或定量分析。
这种固相酶免疫测定方法在1971年zui初建立时称为酶联免疫吸附剂测定(Enzyme Linked ImmunoSorbent Assay),简称ELISA。
抗原抗体反应 :1:可逆性 抗原与抗体结合形成抗原抗体复合物的过程是一种动态平衡,其反应式为:
Ag+Ab→Ag·Ab
抗体的亲和力(affinity),可以用平衡常数K表示:K=[Ag·Ab]/[Ag][Ab] ,Ag·Ab的解离程度与K值有关。高亲和力抗体的抗原结合点与抗原的决定簇在空间构型上非常适合,两者结合牢固,不易解离。解离后的抗原或抗体均能保持原有的结构和活性。
【犬乙型肝炎表面抗原(HBsAg)ELISA试剂盒原理】 特异性:抗原抗体的结合发生在抗原的决定簇与抗体的结合位点之间。化学结构和空间构型互补关系,具有高度的特异性。(测定某一特定的物质,而不需先分离待检物。)
化学比色法的敏感度为mg/ml水平
酶反应测定法的敏感度约为5-10μg/ml
免疫测定中凝胶扩散法和浊度法的敏感度与酶反应法相仿
标记的免疫敏感度可提高数千倍,达ng/ml水平
例如,HBsAg,其敏感度可达0.1ng/ml。
【犬乙型肝炎表面抗原(HBsAg)ELISA试剂盒原理】免疫测定在ELIASA检验中的应用
由于各种抗原成份,包括小分子的半抗原,均可用以制备特异性的抗血清或单克隆抗体,利用此抗体作为试剂就可检测标本中相应的抗原,因此免疫测定的应用范围极广。
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