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面议货号:WT-E5292【犬转移生长因子β1(TGF-β1)ELISA试剂盒实验】ELISA试剂盒定量测定
ELSIA操作步骤复杂, 影响反应因素较多, 特别是固相载体的包被难达到各个体之间的*, 因此在定量测定中, 每批测试均须用一系列不同浓度的参考标准品在相同的条件下制作标准曲线。 测定大分子量物质的夹心法 ELISA, 标准曲线的范围一般较宽, 曲线zui高点的吸光度可接近2. 0, 绘制时常用半对数纸以检测物的浓度为横坐标,以吸光度为纵坐标,将各浓度的值逐点连接,所得曲线一般呈S形,其头、尾部曲线趋于平坦, *较呈直线的部分是的检测区域。【犬转移生长因子β1(TGF-β1)ELISA试剂盒实验】 甲胎蛋白质 ELI SA测定的标准曲线示例见图4-1。测定小分子量物质常用竞争法(参见2.2),其标准曲线中吸光度与受检物质的浓度呈负相关。标准曲线的形状因试剂盒所用模式的差别而略有不同。 ELISA测定的标准曲线示例见图4-2。注意图中横坐标为对数关系, 这更有利于测定系统的表达。【犬转移生长因子β1(TGF-β1)ELISA试剂盒实验】
假阳性多,本底高甚至花板原因:1:过期试剂不能使用2:加样时注意更换吸头。尽可能避免污染。3:避免加酶时污染,应对先加样后加酶的操作,加酶时要注意吸头不要接触标本,造成污染。当可能造成污染时,一定要更换吸头,切忌侥幸心理。4:注意控制恒温箱温度,尽可能让其稳定在37±0.5℃。5:如果整个操作时间过长、造成反应时间不同(*孔与zui后一孔反应时间相差很悬殊)。气温高时更明显。建议在尽可能短的时间内完成操作。尽量不要堆积多块板子操作(尤其手工操作时)。6:按照要求倍数稀释洗液,避免洗液稀释倍数过高。7:洗板次数按试剂要求,不可任意减少洗板次数,8:洗板时浸泡时间不够,应按要求操作,并适当延长浸泡时间。9:手工洗板方式需要正确,洗板时,垂直加入洗液,保证一定的冲击力;洗液要注满板孔,并保证30-60秒的浸泡时间。10:防止组分的污染。如使用容器,注意容器的清洁。【犬转移生长因子β1(TGF-β1)ELISA试剂盒实验】
重复性不好:重复同一样品时,加样量与加样时间相同;同时注意移液器的校准。加样后应该将酶标板放置在微量振荡器上,充分混合;标本保证*、无污染;尽可能由同一名操作人员操作。尽可能模拟相同的反应条件。
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