亚铁血红素测试盒 (DIHM-250)
时间:2016-11-19 阅读:490
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北京绿源伯德生物科技有限公司 -
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490次产品说明 亚铁血红素是卟啉家族中的重要成员,既可用来合成线粒体和细胞质, 也是血红蛋白、细胞色素、过氧化氢酶和过氧化物酶等蛋白质的关键辅基。亚铁血红素被广泛的应用于各种血液疾病的检测中。
在科研和药物研发中,方便、直接、自动化的亚铁血红素浓度检测手段是zui为理想的。本公司研制的亚铁血红素检测试剂盒是基于改良的曲通碱性溶液法。通过这种方法,亚铁血红素可被转化为有色物质,在波长为400 nm下检测,其颜色深浅程度与亚铁血红素的含量成正比。通过配方的改良,充分减小了未处理的样品中其他杂质的干扰,同时也提高了灵敏度。
产品用途 1.直接检测血清、血浆、尿液和亚铁血红素酶中的亚铁血红素含量。
2.适用于药理学研究,检测药物对亚铁血红素代谢的影响。
3.适用于新药开发,高通量筛选影响亚铁血红素含量的药物。
产品特点 灵敏、准确:在96孔板中测试,亚铁血红素的线性测试范围在0.6 μM 到125 μM之间。
简单、高通量:整个测试过程只需加入一种工作试剂并读取吸光度。利用96孔板的高通量检测手段,每天可以测试上千份样本。
安全:试剂无毒性。
多功能性:检测可以在96孔板或比色皿中进行。
试剂盒规格(采用96孔板可测试250份样本) 试剂:50 mL 校准液:10 mL(相当于62.5 μM 亚铁血红素)
储藏条件:可在室温下运输。试剂在4°C环境下保存。
预防措施:本产品仅供研究用。使用过程中应严格遵循实验安全措施。
96孔板测试步骤 1. 空白对照和校准品:取透明平底96孔板,将50 μL的水(空白对照)和50 μL的校准品放入不同孔中,并在其中各加200 μL水,稀释的校准品相当于62.5 μM亚铁血红素。
2. 样品:血清和血浆样品可以直接用于检测(n = 1),全血液样品应先用蒸馏水稀释100倍(n = 100), 搅荡, 在1,4000 rpm 下离心5 分钟,取上清夜测定。 将50 μL样品放入孔中 (注意:在吸取时避免气泡产生)。在样品孔中加入200 μL试剂,轻敲使其混合。
3.室温下反应5分钟,在400nm处(波长范围 380-420nm)读取吸光度。
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比色皿测试步骤 1.将100 μL样本和1000μL的试剂放入比色皿中,轻敲使其混合,在400nm的波长下读取吸光度。
2.在比色皿中加入100μL校准品和1000μL水。在400nm的波长下读取吸光度。
浓度计算 样本中亚铁血红素的浓度计算如下:
OD样本, OD校准品和 OD空白分别是样本、校准品和空白对照的吸光度。n 是稀释因数(血液样本的稀释因数是100)。 单位换算: 1 mg/dL 的亚铁血红素相当于15.3 μM, 0.001% 或 10 ppm。
实验必需品(未提供) 吸液用仪器及其附件。采用96孔板测试:透明平底96孔板、微孔板分析仪;采用比色皿测试:比色皿、分光光度仪。
96孔板测试标准曲线
论文发表 [1]. Mingone, C.J. et al (2006). Protoporphyrin IX generation from delta-aminolevulinic acid elicits pulmonary artery relaxation and soluble guanylate cyclase activation. Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol 291: L337–L344.
[2]. Pamplona, A. et al (2007). Heme oxygenase-1 and carbon monoxide suppress the pathogenesis of experimental cerebral malaria. Nature Med. 13(6): 703-710.
[3]. Raghuram, S. et al (2007). Identification of heme as the ligand for the orphan nuclear receptors REV-ERBb and REV-ERBb. Nat Struct Mol Biol. 14(12):1207-13. |