EGY48 Chemically Competent Cell

酵母菌化学感受态细胞

温馨提示

见我司（懋康生物）整理的酵母双杂交（Yeast two-hybrid assay）产品专题。

产品标签

LexA双杂交系统；EGY48；Y2HGold；pGBKT7；pLexA；Aureobasidin A （AbA）；金担子素；

产品信息

产品包装

产品描述

酵母双杂交系统是用于体内研究蛋白相互作用的一种非常便利的工具，目前采用的有LexA系统和GAL4系统。在LexA系统中，DNA结合域（DNA- BD）由一个完整的原核蛋白LexA构成，转录激活域（AD）由一个大肠杆菌来源的含88个氨基酸残基的酸性肽B42构成），在酵母中能活化基因的转录。正常情况，BD和AD不会结合，将待检测的蛋白质分别与BD和AD融合，形成诱饵融合蛋白（bait-DNA）和诱捕融合蛋白（prey-DNA），只有当诱饵和诱捕蛋白发生相互作用，促使BD和AD的相互接近，才能激活报告基因的转录。

EGY48是LexA系统酵母双杂交用实验菌株，MATα型，能直接转化质粒进行蛋白相互作用验证或双杂交文库筛选和构建。转化标记为ura3，his3，trp1。报告基因为LEU2。EGY48-LexA酵母双杂交系统需要三种质粒配套使用，分别为pLexA、pB42AD和p8op-LacZ。质粒pLexA的筛选标志为HIS3，用于表达诱饵融合蛋白。pB42AD的筛选标志为TRP1，用于表达诱捕融合蛋白。报告质粒p8op-LacZ的筛选标志为URA3，报告基因为LacZ，报告基因UAS来源于LexA op (x6)，只有当诱饵（Bait）和诱捕（Prey）相互作用才能启动LacZ表达。

本品为经特殊工艺制备的EGY48酵母菌化学感受态细胞，用pGBKT7质粒检测转化效率＞10⁴cfu/μg DNA。且在-80℃能稳定保存三个月。

基因型

MATα, ura3, his3, trp1, LexAop (x6)-LEU2

注意事项

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

1. 取100 µl冰上融化的EGY48化学感受态细胞，依次加入预冷的目的质粒2-5 µg，Carrier DNA （95-100℃ 孵育5 min，快速冰浴。重复一次。）10 µl，PEG/LiAc 500µl，用枪吹打几次充分混匀，30℃水浴30 min（在15min时翻转6-8次混匀）。
2. 之后将管子放42℃水浴15 min（在7.5min时翻转6-8次混匀）。
3. 5000 rpm离心40s弃上清，用400 µl ddH₂O重悬沉淀，离心30s弃上清。
4. 用50 µl ddH₂O重悬，涂板，放入29℃培养48-96 h。

 — —Written/Edited by V. Shallan【版权归MKBio懋康所有】

上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科学和生物技术领域研究的试剂、仪器和实验室消耗品与实验服务工作，主要从事细胞生物学、植物学、分子生物学、免疫学、生物化学、蛋白组学。生物制药与诊断试剂研发生产等领域。 本公司秉承“以人为本，以诚为信、合同守信”的经营理念。坚持"品质保障"的原则为广大客户提供优质产品。

EGY48酵母化学感受态细胞

EGY48酵母化学感受态细胞