Ar A4 Chemically Competent Cell 农杆菌化学感受态细胞

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Ar A4；Ar Qual；MSU440；K599；Agrobacterium rhizogenes发根农杆菌；pCAMBIA2301；Streptomycin 链霉素；Rifampicin利福平；

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【好消息】：见我司懋康生物整理的根癌（发根）农杆菌感受态细胞技术专题。

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产品描述

发根农杆菌（Agrobacterium rhizogenes）是根瘤菌科农杆属的一种革兰氏阴性土壤细菌，能够侵染大多数双子叶植物和少数单子叶植物以及个别裸子植物。起关键作用的是其携带的Ri质粒，含有负责发根自主性生长和冠瘿碱合成的基因。结构上与Ti质粒类似，主要有致毒区（Vir），T-DNA区以及冠瘿碱合成功能区等。 

根据合成冠瘿碱的不同，Ri质粒分为4种类型：1）甘露碱型；2）黄瓜碱型；3）农杆碱型；4）米奇矛型。

发根农杆菌菌株Ar A4含天然农杆碱型Ri质粒，具有广泛的宿主范围（玉米，烟草，胡萝卜、甘草等），同时具有卡那霉素抗性。 

我司（懋康生物）提供的Ar A4化学转化感受态细胞经特殊工艺制作，基因型为Agrobacterium rhizogenes (kanR) Ar A4 Ri (agropine type)，经pK7WGF2质粒（壮观霉素抗性）检测转化效率>104cfu/μg DNA。

注意事项

7）   Ar A4具有卡那霉素抗性，不可用于具卡那霉素抗性质粒的转化。

8）   为了保证号的转化效率，发根农杆菌的培养务必使用TY培养基（配方见附表1）。

9）   为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

1)        取-80℃保存的感受态细胞于室温或手心片刻待其部分融化，达到冰水混合状态时插入冰浴中使其*融化。

2)        往100μl感受态细胞悬液中加入0.01~1μg质粒DNA（转化效率较高，*次使用前号做预实验确定所加质粒的量），用手快速、剧烈拨管底混匀或用枪吹吸混匀，依次放于冰中间静置5min，液氮5min，37℃水浴5min，冰浴5min。

3)        冰浴中拿出放室温，加入700μl无抗生素的TY液体培养基，于28℃振荡培养2h。

4)        6,000rpm离心1min，吸掉600ul上清，之后用枪轻轻吹打重悬菌体。之后加到含相应抗生素的TY平板上，用无菌玻棒轻轻的将细胞均匀涂开。室温正置10 min，待液体被吸收后，倒置平板，28℃培养2-3天。

 — —Written/Edited by V. Shallan【版权归MKBio懋康所有】

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Ar A4化学感受态细胞

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