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Alexa Fluor 750标记麦胚凝集素
产品标签
Alexa Fluor 488-WGA;Alexa Fluor 594- WGA;FITC-WGA 麦胚凝集素;Rhodamine-WGA小麦胚芽凝集素;Plasma membrane质模标记;Golgi apparatus高尔基体染色;Yeast bud scars酵母出芽痕;
产品信息
产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格(元) |
Alexa Fluor 750-WGA (Alexa Fluor 750 labeled Wheat Germ Agglutinin) Alexa Fluor 750标记麦胚凝集素 | MP6336-1MG | 1mg | 1630 |
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产品描述
麦胚凝集素(Wheat Germ Agglutinin,WGA)是广泛应用于细胞生物学的凝集素之一。WGA识别的糖类受体是N-乙酰葡糖胺(GlcNAc),倾向与N-乙酰葡糖胺的二聚体和三聚体结合。WGA能结合含N-乙酰葡糖胺末端或壳二糖的寡糖,这类结构在许多血清和膜来源糖蛋白中普遍存在。细菌细胞壁肽聚糖、甲壳素(几丁质)、软骨糖胺聚糖和糖脂也能结合WGA。天然WGA还能通过N-乙酰神经氨酸(唾液酸)残基与一些糖蛋白相互作用。WGA适用于胰岛素受体的纯化、血清蛋白和神经示踪。
麦胚凝集素(Wheat Germ Agglutinin,WGA)通常用来标记糖蛋白,用于活细胞或固定细胞的质膜成像,用于组织切片染色或其它标准的免疫分析实验。WGA能用作一种革兰氏染色剂,荧光标记革兰氏阳性菌(非革兰氏阴性菌)。还能用于结合出芽酵母(比如酿酒酵母)的出芽痕。
本品是Alexa Fluor750标记的麦胚凝集素(Alexa Fluor750 labeled Wheat Germ Agglutinin, Alexa Fluor750- WGA),Ex/Em=752/776nm,亲和纯化所得,基本不含未标记的荧光素。建议工作浓度范围是5-20μg/ml。
产品特性
1) 英文同义名:Wheat Germ Agglutinin, Alexa Fluor750 Conjugate; Alexa Fluor750 labeledWheat Germ Agglutinin; Wheat germ agglutinin lectin, Alexa Fluor750 Conjugate; Alexa Fluor750 labeledWGA Lectin;
2) 中文同义名:麦胚凝集素,Alexa Fluor750标记;Alexa Fluor750标记的麦胚凝集素;Alexa Fluor750标记的小麦胚
芽凝集素;
3) 糖类特异性:N-乙酰葡糖胺(GlcNAc)
4) 外观:固体
5) Ex/Em:752/776nm
6) 荧光颜色:近红外
7) 应用:IF、糖生物学
保存与运输方法
保存:-20℃避光干燥保存,至少1年有效。
运输:冰袋运输。
注意事项
1) 本品储存液长期保存可能会产生沉淀,使用前请37℃温育数分钟,之后离心吸取上清使用。此操作基本不会对产生性能造成负影响。
2) 荧光染料都存在淬灭的问题,保存和操作过程中注意避光。
3) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
质膜标记操作流程
一、储存液准备
于使用前,将低温保存的Alexa Fluor750-WGA(1mg)置于室温回温至少30min,低速离心2-3min,往管内加入500µl ddH2O(无菌)制备2mg/ml储存液。短时间使用可保存在2-8℃,长时间使用请根据单次用量分装保存后置于-20℃保存,避免反复冻融,至少一个月稳定。
二、标记活的真核细胞
以下是对贴壁培养在盖玻片上的活细胞的通用染色步骤。用户需根据不同的模型系统和预期效果来优化染色时间和浓度。
2.1制备染色工作液:用合适的生理缓冲液,比如:HBSS(无酚红)(Cat#:MS3505-500ML)或HHBS(Cat#:MS3510-500ML),稀释Alexa Fluor750-WGA(2mg/ml)储存液到工作浓度,常用工作浓度范围为5-20μg/ml。使用细胞培养基稀释WGA偶联物用于标记可能导致增高的非细胞染色背景。
2.2 细胞标记:加入足量的染色工作液wan全覆盖盖玻片上的细胞。37℃孵育10-30min。
2.3 细胞清洗:标记结束后,吸走染色工作液,用合适的缓冲液清洗细胞2次。除非细胞要做固定,此时即可在预热的HBSS或其它适合于成像的缓冲液中封片。
2.4 【可选】细胞固定:可能用4%多聚甲醛固定染色好的细胞,37℃15min,之后用缓冲液清洗,以及做另一种复染。如有必要用0.2% Triton X-100透化细胞。
三、标记固定的真核细胞
以下是对贴壁培养、甲醛固定且未做透化处理细胞的通用染色步骤。用户需根据不同的模型系统和预期效果来优化染色时间和浓度。
3.1细胞固定:4%多聚甲醛固定细胞,37℃处理15min。
3.2细胞清洗:用HBSS(不含酚红)清洗细胞三次。不要透化细胞!!!
3.3准备染色工作液:用合适的生理缓冲液,比如:HBSS(无酚红)(Cat#:MS3505-500ML)或HHBS(Cat#:MS3510-500ML),稀释Alexa Fluor750-WGA(2mg/ml)储存液到工作浓度,常用工作浓度范围为5-20μg/ml。使用细胞培养基稀释WGA偶联物用于标记可能导致增高的非细胞染色背景。
3.4细胞标记:加入足量的染色工作液wan全覆盖盖玻片上的细胞。室温孵育10-30min。
3.5细胞清洗:标记结束后,吸走染色工作液,用合适的缓冲液清洗细胞2次。此时可能用0.2% Triton X-100或其它表面活性剂透化细胞,进行接下来的复染或抗体标记。
3.6细胞成像:按照实验需求用另一复染剂染色,之后在缓冲液内封片或抗荧光淬灭剂来封片。
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— —Written/Edited by V. Shallan【版权归MKBio懋康所有】
上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科学和生物技术领域研究的试剂、仪器和实验室消耗品与实验服务工作,主要从事细胞生物学、植物学、分子生物学、免疫学、生物化学、蛋白组学。生物制药与诊断试剂研发生产等领域。 本公司秉承“以人为本,以诚为信、合同守信”的经营理念。坚持"品质保障"的原则为广大客户提供优质产品。
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