Sulfidefluor 7 AM (SF7-AM) (H2S Probe)

硫化氢荧光探针

产品标签

Sulfidefluor 7 AM (SF7-AM) ; 7-Azido-4-methylcoumarin (AzMC) ；7-氨基-4-甲基香豆su（AMC）；WSP-1 (Washington State Probe-1)；WSP-5；硫化氢（H2S）特异性探针；PAG (DL-propargylglicine)硫化氢合成抑制剂；Hypotaurine  H2S清除剂；CAS NO：1416872-50-8；

产品信息

产品描述

Sulfidefluor 7 AM (SF7-AM)是一种用于硫化氢（H2S）检测的细胞可捕获的荧光探针。一旦进入胞内，乙酰甲酯基团被胞内酯酶水解生成一阴电荷，从而探针被捕获停留在胞内。探针中的叠氮化物官能团与缓冲液或细胞中的H2S反应生成酰胺罗丹明110，最大激发和发射波长分别是498/526nm [1-2]。SF7-AM能用于监测人脐静脉内皮细胞（HUVECS）中VEGF诱导产生的H2S [2-3]。

产品特性

1） CAS NO：1416872-50-8

2） 化学名：N-[2-[(Acetyloxy)methoxy]-2-oxoethyl]-N-[(3',6'-diazido-3-oxospiro[isobenzofuran-1(3H),9'- [9H]xanthen]-5-yl)carbonyl]glycine (acetyloxy)methyl ester

3） 同义名：Sulfidefluor-7 acetoxymethyl ester; SF7 AM;

4） 分子式：C31H23N7O12

5） 分子量：685.6

6） 外观：白色固体

7） 纯度：≥95%

8） Ex/Em：498/526nm

9） 溶解性：溶于DMSO（5mg/ml）、DMF（10mg/ml）

10） 化学结构式：

保存与运输方法

保存：-20ºC避光干燥保存，至少2年有效。 

运输：冰袋运输。

使用方法

1、 储存液制备

将低温保存的产品从冰箱取出，置于室温回温至少20min。低速离心3-5min。之后往瓶内加入适量无水DMSO充分溶解配成适宜浓度的储存液（比如，1mg SF7-AM（Mw: 685.6）加入291μl DMSO充分溶解后即得到5mM储存液）。按照单次用量分装，≤-20℃避光冻存，避免反复冻融，建议1个月使用。

2、 工作浓度

正式实验前，取上述配制的储存液用适当缓冲液或培养基稀释到所需工作浓度即可。具体的工作浓度请参考文献或根据自身实验需求来进行优化调整。参考下方一些实验数据，来自公开文献，仅作参考。

应用示例1：使用SF7-AM来测定VEGF刺激HUVECs产生的内源性H2S。HUVECs加入2.5µM SF7-AM于37℃，5% CO2孵育30min。之后更换不含探针的培养基，细胞成像。对于VEGF刺激，取2µl VEGF（10µg/ml）加入孔内使其终浓度为40ng/ml。细胞再于37℃，5% CO2孵育30min。相同的区域再进行细胞成像。共聚焦成像用488nm氩离子激发器激发，用META检测器收集500-650nm之间的发射荧光信号。【文献来源：Chao, C., Zatarain, J.R., Ding, Y. et al. Cystathionine-β-Synthase Inhibition for Colon Cancer: Enhancement of the Efficacy of Aminooxyacetic Acid via the Prodrug Approach. Mol Med 22, 361–379 (2016). 】

应用示例2：使用SF7-AM来测定OA-CysTCM-1的H2S释放能力。bEnd.3细胞铺在多聚D-赖氨酸包被的培养板上。长满的细胞用PBS清洗后，用SF7-AM（5 µM）孵育30min。之后用PBS清洗，孵育在含OA-CysTCM-1 (100 µM)和半胱av酸（250 µM）或只含半胱av酸（250 µM）的溶液30min。成像前，细胞用PBS清洗后，加入2ml PBS。用带标准GFP滤片的荧光显微镜成像。【文献来源：Zhao Y, Steiger AK, Pluth MD. Cysteine-activated hydrogen sulfide (H₂S) delivery through caged carbonyl sulfide (COS) donor motifs. Chemical Communications (Cambridge, England). 2018 May;54(39):4951-4954. DOI: 10.1039/c8cc02428f. PMID: 29701221; PMCID: PMC5965689.】

Figure. H2S Release from OA-CysTCM-1 in bEnd.3 cells.Top: DIC (left) and GFP (right) channels with cysteine (250 μM) and SF7-AM (5 μM). Bottom: DIC (left) and GFP (right) channels with cysteine (250 μM), OA-CysTCM-1 (100 μM), and SF7-AM (5 μM). Scale bar represents 100 μM.

注意事项

1） 整个染色过程中需注意避光。

2） 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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参考文献

[1] Lippert AR, New EJ, Chang CJ. Reaction-based fluorescent probes for selective imaging of hydrogen sulfide in living cells. J Am Chem Soc. 2011 Jul 6;133(26):10078-80. doi: 10.1021/ja203661j. Epub 2011 Jun 15. PMID: 21671682.

[2] Lin VS, Lippert AR, Chang CJ. Cell-trappable fluorescent probes for endogenous hydrogen sulfide signaling and imaging H2O2-dependent H2S production. Proc Natl Acad Sci U S A. 2013 Apr 30;110(18):7131-5. doi: 10.1073/pnas.1302193110. Epub 2013 Apr 15. PMID: 23589874; PMCID: PMC3645565.

[3] Yuan S, Pardue S, Shen X, Alexander JS, Orr AW, Kevil CG. Hydrogen sulfide metabolism regulates endothelial solute barrier function. Redox Biol. 2016 Oct;9:157-166. doi: 10.1016/j.redox.2016.08.004. Epub 2016 Aug 11. PMID: 27552214; PMCID: PMC4993857.

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