5/6-FAM SE (NHS-Fluorescein, FITC-NHS)

5(6)-羧基荧光素琥珀酰亚胺酯

产品信息

产品描述

NHS-Fluorescein（NHS-荧光素，FITC-NHS），别名：5/6-羧基荧光素琥珀酰亚胺酯（5/6-carboxyfluorescein succinimidyl ester,5/6-FAM SE），是一种荧光素染料的胺反应性衍生物，具有广泛的分析应用，可作为抗体和其他探针的标记，用于荧光显微镜检测、流式细胞分析和免疫荧光测定（如Western印迹和ELISA）。

NHS-Fluorescein（NHS-荧光素，FITC-NHS，5/6-FAM SE）通过琥珀酰亚胺酯（NHS酯）官能团活化。与FITC（异硫氰酸荧光素）相比，在生物偶联上表现出更多优势。首先，FAM形成的酰胺能更好耐受水解，其次，FAM对偶联条件的要求更不严格且有更好的偶联效率，生成的偶联物稳定性更突出。FITC标记的核酸和多肽与对应的FAM标记产物比较，具有更快变质的倾向。据发现，在绝大数的生物应用中都能用FAM试剂来替代FITC试剂。

产品特性

1） CAS NO.：117548-22-8

2） 同义名：5(6)-FAM, SE;5(6)-FAM,NHS ester;5(6)-Carboxyfluorescein NHS ester (mixture of isomers), 5(6)-Carboxyfluorescein N-hydroxysuccinimide ester;5-(and-6)-Carboxyfluorescein, succinimidyl ester;FLUOS; 5 (6)-羧基荧光素N -羟基琥珀酰亚胺酯；NHS-荧光素（5/6-羧基荧光素琥珀酰亚胺酯）,混合异构体；5/6-羧基荧光素琥珀酰亚胺酯；

3） 分子式：C25H15NO9

4） 分子量：473.39

5） 荧光：λex 492 nm; λem 517 nm in DMF

6） 外观：粉末

7） 溶解性：溶于DMSO、DMF

8） 纯度：≥95%

9） 化学结构式：

保存与运输方法

保存：-20℃避光干燥保存，2年有效。 

运输：冰袋运输。

注意事项

1） 5/6-FAM SE是5-FAM和6-FAM的异构体混合物，这些异构体的特性在激发和发射光谱方面无法区分。对于蛋白应用，不需要分离特定异构体。

2） 荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。

2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

SE化合物生物标记的几个考虑因素

1） 溶剂

大多数情况下，SE化合物（反应性染料）都是疏水性分子，需用无水DMF或DMSO作为溶剂。

比如：5/6-FAM SE（Mw：473.39）需先溶于高质量无水DMSO配制成≥1mg/ml的母液，之后加入反应缓冲液中进行标记实验。强烈推荐新鲜配制母液和工作液，如果非要保存母液的话，请务必根据单次用量分装，≤-20℃避光密封干燥保存，尽量在1个月内用完。

2） 反应pH

SE与胺的标记反应具非常强的pH依赖性。胺反应化合物与非质子化的脂肪胺反应，包括：蛋白的末端胺，赖氨酸的ε-氨基。氨酰化通常在pH 7.5以上进行。通过SE基团的蛋白修饰通常在pH 7.5-8.5之间进行，而异硫氰酸基团需在pH 9.0-10.0之间才能获得最佳的标记效果。

3） 反应缓冲液

缓冲液含游离胺（比如：Tris、甘氨suan和巯基化合物）必须避免，因为这些也是胺反应试剂。铵盐（硫酸铵或醋酸铵）普遍用于蛋白沉淀中，必须在进行染料标记之前去除。

比如：5/6-FAM SE进行蛋白标记，可选择50mM硼酸钠缓冲液（pH 8.5）作为反应缓冲液。

4） 反应温度

大部分标记反应在室温进行，然而，对于某些特殊的标记反应可能需提高或降低温度。

相关产品

 — —Written/Edited by V. Shallan【版权归MKBio懋康所有】

上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科学和生物技术领域研究的试剂、仪器和实验室消耗品与实验服务工作，主要从事细胞生物学、植物学、分子生物学、免疫学、生物化学、蛋白组学。生物制药与诊断试剂研发生产等领域。 本公司秉承“以人为本，以诚为信、合同守信”的经营理念。坚持"品质保障"的原则为广大客户提供优质产品。