病毒采样管是由拭子+采样管+病毒保存液三部分构成。目前,病毒保存液具有灭活型及非灭活型两种型号。病毒保存液的质量,是提高PCR检测阳性率与病毒分离阳性率的关键因素,从根本上决定了病毒采样管的质量,病毒采样管检测 第三方检测机构推荐。
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1. 病毒采样管检测对象
毒株:甲型流感病毒HINI (VR- 1469)
细胞:MDCK细胞
2.病毒采样管检测步骤
1)取样品病毒保存液(非灭活型) 9.8mL,加入0.2mL病毒原液混匀,分装若干测试液,存至要求温度;
2)保存至对应天数后取出测试液,检测病毒滴度;
a)10倍倍比稀释测试液;
b)将稀释液加入含生长至单层的MDCK细胞的96孔细胞培养板上,并设置正常对照组,加等量培养液;
c)置于35'C、5%CO2的培养箱中孵育60 min后弃去上清液,加入双抗400 IU/mL的维持培养液继续孵育3~5天,每天观察细胞增长状况;
d)当接种病毒的MDCK细胞出现变圆或缩小等病变现象时,记录产生细胞病变的情况;
e)根据Reed-Muench公式计算半数感染量TCID50。
病毒采样管检测 第三方检测
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