质谱级蛋白酶

Thermo Scientific质谱级蛋白酶

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2023-08-08 13:03:42
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赛默飞世尔科技(中国)有限公司集团

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产品简介

质谱级蛋白酶

详细介绍

出色的选择性—具有 >95% 的 C 端赖氨酸和特异性;LysC 具有 >90% 的 C 端赖氨酸切割特异性
高纯度—未检测到活性()
酶切—/LysC 酶组合可减少缺失切割
增强稳定性—经过化学修饰可降低自溶活性
便利—酶以稳定的冻干或液体形式提供

是一种源自猪胰腺提取物的质谱 (MS) 级蛋白酶,特异性切割赖氨酸和残基的羧基侧。该酶经过 TPCK 处理消除了活性,并通过甲基化进行化学修饰,得到高活性和更稳定的酶形式。可耐受常用的部分变性条件,如 0.1 SDS、1 M 尿素和 10% 乙腈。Pierce 在 pH 7-9 范围内活性较佳,在 pH < 4="" 条件下可逆失活。以="" 1="" mg、5="" 包="" 20="" µg="" 或="" 100="" µg="" 的冻干粉和="" 100="" µg="">

Lys-C 蛋白酶是从产酶溶杆菌中分离获得的质谱 (MS) 级蛋白酶。Lys-C 蛋白酶对赖氨酸残基具有较高的活性和特异性,与(即较少的肽段)相比,肽段较大,样品的复杂性较低。与不同,Lys-C 蛋白酶可以先切割赖氨酸然后切割,这使其适用于序列蛋白酶切,然后进行酶切,以减少切割缺失。这些的 Lys-C 蛋白酶特性可确保单独使用或随后进行酶切时的高酶切效率。此外,Lys-C 原型肽通常具有较高的电荷状态,使其成为 ETD 片段化的酶。

Lys-C 通常用于磷酸肽富集工作流程中,因为可在 N 和 C 端生成带有伯胺的肽,可利用胺反应性同量异位标签对片段进行双标记。这导致肽电离增强和定量限提高,因为在 MS3 采集期间可重新分离更多碎片离子。该酶可用于溶液内或胶内酶切工作流程,以产生用于 LC-MS/MS 蛋白鉴别的肽。

在 37°C 下可在 2 小时内完成高效蛋白酶切。在高度变性条件下(如 8 M 尿素、2 M 盐酸胍、1% SDS、2% CHAPS 和 40% 乙腈),Lys-C 蛋白酶可保持活性,并在 pH 7–9 条件下充分发挥作用(pH 8 下活性)。该冻干酶的质量为 30 kDa,在 –20°C 下储存时可保持稳定 1 年。该 Lys-C 酶以冻干形式(20 µg 或 100 µg含量)包装。

/Lys-C 蛋白酶混合物是和 LysC 蛋白酶的冻干混合物,已经过优化以提高蛋白酶切效率。尽管通常用于蛋白酶切,但单独这一种蛋白酶并不足以酶切赖氨酸和残基的羧基端的蛋白。因此,Lys-C 蛋白酶通常与共同作用,以连续酶切蛋白,缺失切割较少。/Lys-C 蛋白酶混合物以 20 µg、5 x 20 µg 或 100 µg 灵活规格提供。根据酶与蛋白比值,酶切可在短短 1.5–3 小时内完成或者最长过夜完成。

、GluC、Asp-N 蛋白酶

• 增加序列覆盖范围—具有互补色谱、电离和片段化特性的重叠肽的蛋白表征结果较佳
• 高比活性—每种蛋白酶都具有的酶特异性
•稳定—以冻干形式提供

Asp-N 蛋白酶是一种 MS 级锌金属蛋白酶,来源于莓实假单胞菌的突变菌株,需要痕量锌来维持活性。Asp-N 蛋白酶主要在半氧化产生的天冬氨酸和半的氨基侧切割。也可能在残基切割;但是,谷氨酰基残基的切割率显著低于天冬氨酸残基的切割率。在 37°C 条件下,Asp-N 蛋白酶可在 2–20 小时内高效酶切蛋白,活性大于 20,000 单位/mg 蛋白,在变性条件(如 1 M 尿素、2 M 盐酸·胍、0.1% SDS、2% CHAPS 和 10% 乙腈)下仍可保持活性,在 pH 6–8 条件下具有较佳活性。该冻干酶的质量为 27 kDa,在 -20°C 下储存时可保持稳定 1 年。

Glu-C 蛋白酶也称为 V-8 蛋白酶,是从中分离获得的 MS 级蛋白酶。Glu-C 蛋白酶特异性切割碳酸氢铵和醋酸铵缓冲液中残基的羧基侧,产生少量的肽片段。在磷酸盐缓冲液中也可能在和天冬氨酸残基切割。在 37°C 条件下,Glu-C 蛋白酶可在 5–18 小时内高效酶切蛋白,活性大于 500 单位/mg 蛋白,在变性条件(如 2 M 尿素、1 M 盐酸胍、0.1% SDS、2% CHAPS 和 20% 乙腈)下仍可保持活性。在 pH 8 条件下,Glu-C 蛋白酶活性较佳。该冻干酶的质量为 27 kDa,在 -20°C 下储存时可保持稳定 1 年。

是一种从牛胰腺中分离获得的 MS 级胞内蛋白酶,特异性切割、苯、和的羧基侧。在牛胰腺中发现两种主要形式的 A 和 B,其含量相等。它们是相似的蛋白质(80% 同源性),但具有不同的蛋白水解特征。Thermo Scientific 有两种形式的。由于可能与天然来源的共纯化,Thermo Scientific 经 TLCK 处理以消除可能的活性,提高酶切特异性。可以耐受温和的变性条件,如 0.1% SDS、2 M 尿素、2 M 盐酸·胍、1% CHAPS 和 30% 乙腈,在 pH 7.5–8.5 条件下具有较佳活性。该冻干酶的质量为 25 kDa,在 -20°C 下储存时可保持稳定 1 年。

For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.
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