Thermo Scientific Pierce NHS 活化磁珠可以通过简单的混合即用形式将蛋白质与磁珠进行共价、胺基偶联，以便用于定制的亲和纯化实验。

NHS 活化磁珠的特点：

•高容量—与其他供应商的 NHS 活化磁珠相比，结合能力至少高四 倍
• 易于使用—只需极少的手动操作时间，即可在一步式反应中固定化
• 安全—不需要有害化学品（如氰基和溴化氰）
• 配体兼容—可用于通过几乎任何含有伯胺的化合物或亲和配体进行固定化
• 较低的非特异性结合—微珠表面被预封闭，任何非反应的 NHS-酯基团均被淬灭
• 方案兼容—微珠偶联蛋白和下游应用可通过手动或自动化（例如，Thermo Scientific KingFisher 仪器）方式执行

活化的磁珠含有能与伯胺反应以形成稳定的酰胺键的 N-羟基-琥珀酰亚胺 (NHS) 功能基团。一旦它们共价连接，固定的蛋白会对磁珠表面的浸出具有很高的耐受性。在实验中使用制备的磁珠时，非特异性结合可忽略不计，因为在偶联程序中，非反应 NHS-酯基团被封闭。Pierce NHS 活化磁珠可通过手动磁力架或自动平台（例如，Thermo Scientific KingFisher 仪器）进行偶联和处理。

应用：
• 用于纯化重组蛋白的配体固定化
• 抗体固定化，用于洗脱液中不含抗体污染的免疫沉淀和免疫共沉淀
• 利用腹水、血清和细胞培养上清液对抗体亚型进行亲和纯化的二抗固定化

Pierce NHS 活化磁珠为任何所需蛋白质偶联到磁珠表面提供了一种便利的方式。这一过程不需要危险化学品或冗长的反应方案。磁珠首先与蛋白在 pH 7 到 9 的无胺缓冲液中孵育 1 到 2 小时，以通过 NHS-酯化学进行共价偶联。随后磁珠被洗涤，任何剩余的活性 NHS-酯基团被淬灭。胺反应性化学及后续的淬灭可在 3 至 4 小时内完成。偶联蛋白不会从磁珠表面浸出。此外，由于有效淬灭和包被基底微粒表面的专有封闭试剂，磁珠表现出非常低的非特异性结合。偶联后，制备的磁珠通常用于亲和纯化程序。