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裸鼠程序性死亡配体elisa试剂盒可同时检测天然或重组的,且与其他相关蛋白无相互反应。
特点:在经过酶反应显示的有色产物大多比较稳定,因此有利于样品的保存。对检测结果即可用肉眼观察,又可用显微镜观察,也可以用分光光度计进行比色测定,还可用显微镜观察。这是因为某些酶反应产物能使电子密度发生改变,从而引起被检测物的显示。
仪器要求:对免疫没技术来说,不需要荧光显微镜,也不需要测定放射性的特殊仪器,所用仪器及试剂均属一般性仪器与试剂,普通实验室及生产应用单位均易购置。
实验应注意的事项:
1.正式试验时,应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件,待检样品应作一式二份,以保证实验结果的准确性。
2.在ELISA中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括:
(1)固相载体的选择:目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。
(2)包被抗体(或抗原)的选择:将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。吸附温度,时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃ 18~24小时。
(3)酶标记抗体工作浓度的选择:首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定。然后再固定其它条件或采取“方阵法”在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。
(4)酶的底物及供氢体的选择:对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应,而本身无色。有些供氢体有潜在的致癌作用,应注意防护。底物作用一段时间后,应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间,以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制,尤其是H2O2在临用前加入。
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