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产品名称:SAC-ⅡB2小鼠腹水瘤细胞
细胞特性
细胞名称:SAC-ⅡB2小鼠腹水瘤细胞
细胞描述:SAC-IIB2的一个克隆源自SRS-82细胞株,经有限稀释而得。 该细胞株X-C测试阳性,细胞质和细胞表面都有A型和C型病毒颗粒。 染色体数目是多倍体。 细胞中发现有染色体标记A,B和M。
动物种别:小鼠
组织来源:腹水瘤细胞
形态:
培养基和添加剂:RPMI-1640(GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, glucose 2.5g/L, Sodium Pyruvate 0.11g/L),90%;胎牛血清,10%。 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度。
REFERENCE:Chines J. Pathophysiol. 3(2):66,1987.
基本特性:
描述:(1)所有细胞株购自ATCC;
(2) 公司可提供新鲜或冻存细胞株;
(3) 细胞株数量约 1000000个/瓶;
(4) 不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌
密度超过90%,并且细胞状态很好时,则复温后2个小时需要立即传代,提供复苏好的细胞株,贴壁及悬浮细胞形式,细胞状态良好,饱满、光泽度好,*,并提供细胞报价、所需培养基、种属来源、组织来源、形态、背景资料等。
复苏方法细胞用途:仅供科研使用。
1.从液氮罐中取出安剖;有时因安剖未封严,浸入了液氮,取出后因安剖内液氮迅速气化而发生爆炸,因此应带有防护眼睛和手套。
2.迅速放入盛有36℃~37℃水的搪瓷罐中,扣上盖并不时摇动,尽快解冻。
3.剪开纱布口袋,取出安剖,用70%酒精擦拭消毒后,净化台上打开盖,用吸管吸出细胞悬液,装入离心管中,再补加10ml培养液,吹打使细胞悬浮。
4.低速离心(500~1000转/分)5分钟,取上清后再重复用培养液漂洗、离心。
5.加入培养液适当稀释后,再移装入培养瓶中,置温箱培养,次日更换一次培养液后再继续培养。
我公司认为购买细胞的客户有培养细胞的经验,客户收到细胞,原瓶里的培养液可以收集继续使用,在*次消化传瓶时,我们要求客户留一瓶细胞继续使用我们的培养液,其它瓶的细胞客户可使用自己的培养液,这样可减少由于细胞不适应培养液导致的细胞问题。
来源有保障(世界*品牌),状态且传代次数好,经测试不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。每管含有细胞数>1000000个,具有高品质、高纯度、高稳定性等特点,纯化技术保证产品性能。
运输方式:活细胞运输(T-25 flasks)。
细胞纯度:95%。
细胞来源:ATCC等。
包装:内层无菌自封袋,防压泡沫盒,外层防压保温气泡袋,说明书。
用途:本产品只提供给进一步的科研使用,不可应用于治疗等其他方面。
细胞冻存
1.将细胞消化下来,移入离心管离心,弃上清
2.准备冻存液比例:50%FBS+40%培养基+10%DMSO(现用现配)
3.加1.5冻存液在离心管中,将细胞吹打均匀,移入冻存管内.
放入-20度冰箱2-4小时后.再放入-80度冰箱过夜,第二天放入液氮罐保存.
本公司的细胞培养操作规程,供参考
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备DMEM培养基(DMEM,GIBCO,货号11965-092),90%;胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1.弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入3ml此细胞的培养基终止消化。
3.轻轻吹打后吸出,移入15ml离心管中,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养液后吹匀。
4.移入到事先准备好的含有5ml培养基的T-25培养瓶中或含有14ml培养基的T-75培养瓶中培养。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,先要消化处理并进行细胞计数。消化方法按照细胞传代方法的1-3步骤进行,zui后的重悬液使用血清。悬浮细胞直接计数后离心,用血清重悬浮,加DMSO至zui终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
传代时间:2-3天 3-5天
传代比例:1:2~1:3 1:1~1:2
细胞活力:95%(Viability by Trypan Blue Exclusion)
细胞实验安全性:所有细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需高压灭菌后方能丢弃。收到细胞后,在倒置镜下(是在4X物镜)观察整个细胞生长情况。
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