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产品名称：SK-BR-3细胞

细胞名称：SK-BR-3
细胞描述：1970年G. Trempe 和 L.J. Old从胸水中建立了这株细胞。 没病毒颗粒。 超微结构特征包括微丝和桥粒，肝糖原颗粒，大溶酶体，成束的细胞质纤丝。 SK-BR-3细胞株过表达HER2/c-erb-2基因产物[30816]。 预定此细胞需至少提前两周。 在本库通过支原体检测。 在本库通过STR检测。
动物种别：人
组织来源：器官：乳房疾病：腺癌取材转移灶：胸水
形态：上皮细胞
培养基和添加剂：DMEM培养基(GIBCO,货号12800017，添加NaHCO3 1.5g/L)，90%；优质胎牛血清，10%。 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度。
REFERENCE：Trempe GL . Human breast cancer in culture. Recent Results Cancer Res. 57: 33-41 , 1976. PubMed: 1013510 Fogh J , et al. Absence of HeLa cell contamination in 169 cell lines derived from human tumors. J. Natl. Cancer Inst. 58: 209-214, 1977. PubMed: 833871 Fogh J , et al. One hundred and twenty-seven cultured human tumor cell lines producing tumors in nude mice. J. Natl. Cancer Inst. 59: 221-226, 1977. PubMed: 327080 Chin J Oncol. 24(4):327-330,2002 Acta Biochimica et Biophysica Sinica 35(4):371-374,2003

基本特性：
描述：（1）所有细胞株购自ATCC；
（2） 公司可提供新鲜或冻存细胞株；
（3） 细胞株数量约 1000000个/瓶；
（4） 不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌

密度超过90%,并且细胞状态很好时,则复温后2个小时需要立即传代，提供复苏好的细胞株，贴壁及悬浮细胞形式，细胞状态良好，饱满、光泽度好，*，并提供细胞报价、所需培养基、种属来源、组织来源、形态、背景资料等。

复苏方法细胞用途：仅供科研使用。
                       

1．从液氮罐中取出安剖；有时因安剖未封严，浸入了液氮，取出后因安剖内液氮迅速气化而发生爆炸，因此应带有防护眼睛和手套。

2．迅速放入盛有36℃～37℃水的搪瓷罐中，扣上盖并不时摇动，尽快解冻。

3．剪开纱布口袋，取出安剖，用70％酒精擦拭消毒后，净化台上打开盖，用吸管吸出细胞悬液，装入离心管中，再补加10ml培养液，吹打使细胞悬浮。

4．低速离心（500～1000转/分）5分钟，取上清后再重复用培养液漂洗、离心。

5．加入培养液适当稀释后，再移装入培养瓶中，置温箱培养，次日更换一次培养液后再继续培养。

 我公司认为购买细胞的客户有培养细胞的经验，客户收到细胞，原瓶里的培养液可以收集继续使用，在*次消化传瓶时，我们要求客户留一瓶细胞继续使用我们的培养液，其它瓶的细胞客户可使用自己的培养液，这样可减少由于细胞不适应培养液导致的细胞问题。
 

来源有保障（世界*品牌），状态且传代次数好，经测试不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。每管含有细胞数>1000000个，具有高品质、高纯度、高稳定性等特点，纯化技术保证产品性能。
运输方式：活细胞运输（T-25 flasks）。
细胞纯度：95%。
细胞来源：ATCC等。
包装：内层无菌自封袋，防压泡沫盒，外层防压保温气泡袋，说明书。

用途：本产品只提供给进一步的科研使用，不可应用于治疗等其他方面。

细胞冻存
１．将细胞消化下来，移入离心管离心，弃上清
２．准备冻存液比例：５０％ＦＢＳ＋４０％培养基＋１０％ＤＭＳＯ（现用现配）
３．加１．５冻存液在离心管中，将细胞吹打均匀，移入冻存管内．
放入－２０度冰箱２－４小时后．再放入－８０度冰箱过夜，第二天放入液氮罐保存.

本公司的细胞培养操作规程，供参考
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备DMEM培养基(DMEM，GIBCO，货号11965-092)，90%；胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3ml此细胞的培养基终止消化。
3.轻轻吹打后吸出，移入15ml离心管中，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养液后吹匀。
4.移入到事先准备好的含有5ml培养基的T-25培养瓶中或含有14ml培养基的T-75培养瓶中培养。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，先要消化处理并进行细胞计数。消化方法按照细胞传代方法的1-3步骤进行，zui后的重悬液使用血清。悬浮细胞直接计数后离心，用血清重悬浮，加DMSO至zui终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。

传代时间：2-3天 3-5天

传代比例：1:2~1:3  1:1~1:2

细胞活力：95％（Viability by Trypan Blue Exclusion）

细胞实验安全性：所有细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需高压灭菌后方能丢弃。收到细胞后，在倒置镜下(是在4X物镜)观察整个细胞生长情况。

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细胞名称：SK-BR-3    细胞
组织来源：肋膜渗出液转移灶
培养条件： RPMI-1640+10% FBS
形 态：贴壁；上皮细胞样