人髓过氧化物酶(MPO)ELISA试剂盒 实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人髓过氧化物酶（MPO）水平。用纯化的人髓过氧化物酶（MPO）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中加入髓过氧化物酶（MPO），再与HRP标记的羊抗人抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过*洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的髓过氧化物酶（MPO）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人髓过氧化物酶（MPO）的含量。
人髓过氧化物酶(MPO)ELISA试剂盒 试剂盒组成
1
20倍浓缩洗涤液
30ml×1瓶
7
终止液
6ml×1瓶
2
酶标试剂
6ml×1瓶
8
标准品（900U/L）
0.5ml×1瓶
3
酶标包被板
12孔×8条
9
标准品稀释液
1.5ml×1瓶
4
样品稀释液
6ml×1瓶
10
说明书
1份
5
显色剂A液
6ml×1瓶
11
封板膜
2张
6
显色剂B液
6ml×1/瓶
12
密封袋
1个
标本处理及要求
1．血清、血浆标本可直接测定；
2．组织：取相关组织1g 于5ml PBS中匀浆，室温孵育5小时（期间不时旋涡混合）后，2000-3000转/分离心10分钟后，取上清液待测。
3．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
4．采集后尽早进行实验，若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。
操作步骤
1.标准品的稀释与加样：在酶标包被板上按序设标准品孔10孔，在、第二孔中分别加标准品100μl，然后在、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；再各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后，在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉；再各取50μl分别加到第五、第六孔中；再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中；再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中；再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为 600          U/L，400 U/L ，200 U/L，100 U/L，50 U/L）。
2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，轻轻晃动混匀。
3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。  
4.配液：将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用
5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7.温育：操作同3。
8.洗涤：操作同5。
9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。