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猪氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA试剂盒样品的收集、处理及保存方法:
1、血清→操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血红细胞迅速小心地分离。
2、血浆→EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3、细胞上清液→1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4、组织匀浆→将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液。
5、保存→如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
猪氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA试剂盒的实验操作中应注意以下条款:
●试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
●实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
●不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
●使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
●使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
●底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
●加入试剂的顺序应*,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
●按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
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