胰岛素elisa试剂盒的设计使用了高纯度的抗体。三明治夹心法ELISA试剂盒,均经过单克隆抗体和多克隆抗体对的筛选,并寻找出能特异性检测目标物的较好抗体对组合。经挑选后的抗体对需经过滴定实验,挑选出能得到较好结果的抗体对浓度。在研发的过程中,不同浓度的捕获抗体包被在微孔板上进行实验,从而挑选出结合力较强和精确度较高的捕获抗体浓度。接下来,进行不同浓度的检测抗体筛选实验,挑选出能与捕获抗体配对并表现较好信噪比的检测抗体浓度。
胰岛素elisa试剂盒样品收集、处理及保存方法
1、 血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2、 血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3、 细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4、 组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液
5、 保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70 ℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
胰岛素elisa试剂盒注意事项
1、试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2、浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3、各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间控制在 5 分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4、请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD 值大于标准品孔*孔的OD 值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n 倍)后再测定,计算时请后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5、封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6、底物请避光保存。
7、严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准、
8、所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。