植物红色叶绿素降解产物还原酶(RCCR)ELISA试剂盒等江苏科晶生物科技有限公司ELISA试剂盒(酶联免疫分析试剂盒)人、大鼠、小鼠、豚鼠、牛、猪、犬、马、鸡等各种ELISA试剂盒及各种动物的血清和各种抗原抗体，产品种类繁多、货物齐全，效果稳定、灵敏度高、特异性强，免费提供代测服务。电子版ELISA试剂盒(酶联免疫分析试剂盒)说明书免费赠送，且免费提供产品报价、用途、规格等方面的咨询。如有需要我们将竭诚为您服务！

科晶生物植物红色叶绿素降解产物还原酶(RCCR)ELISA试剂盒等ELISA试剂盒产品常见技术指南：

1、选择抗体时选择一个单抗和一个多抗进行配对；若选择两个单抗，必须识别不同表位的抗体；从同一家公司选择抗体对。

2、ELISA实验中为了确定好的信号和zui低背景应将捕获抗体（0.5-4μg/ml）和检测抗体（0.25-2μg/ml）在预实验中进行彼此相抗的滴定。同时，应包括在适当范围内的标准品的系列稀释。按试剂说明书常规提供的范围进行操作。

3、标准品的配制：对于每种细胞因子应仔细阅读说明书，注意每批的细节。在使用细胞因子前，瞬时离心试剂瓶，尽可能多地收回其中的细胞因子。根据每批说明书中的细节，将冻干的细胞因子复溶。

4、一般待测抗原标准曲线的线性范围的可通过将标准品做8次2倍系列稀释从2000pg/ml 到15pg/ml。可利用标准的ELISA操作流程、放大试剂盒、第三类试剂、或改变酶底物系统可在一定范围内提高灵敏度。

5、为了优化灵敏度，建议过夜孵育标准品和标本。

6、若使用过氧化物酶作为显色系统，应严禁在洗液和稀释液中加叠氮钠，叠氮钠可抑制过氧化物酶的活性。

7、当测定混合液体中的抗原时，如血清，建议在标本稀释液中加不相干的Ig。

目前市场上，植物红色叶绿素降解产物还原酶(RCCR)ELISA试剂盒等ELISA试剂盒产品既有国产也有进口，数量繁多令人目不暇接，怎样才能选出zui适用的产品呢？首先当然得根据我们所要检测的分子进行检测，除此以外也还有一些需要加以考量的因素。

1. 抗体类型

单克隆抗体和多克隆抗体都能够用于ELISA，实际上有时候二者结合效果更好。例如，对于双抗夹心法而言，用多抗进行捕获而单抗进行检测有时更有帮助。多抗能够确保捕获所有抗原，随后单抗再特异性检测拥有特定抗原表位的抗原。

双抗夹心法ELISA中捕获抗体与检测抗体（不论多抗还是单抗）的配对很有讲究。我们不希望捕获抗体与检测抗体竞争抗原上的同一位点，为此我们就需要确保捕获抗体和检测抗体所识别的抗原表位不存在重叠。如果捕获抗体和检测抗体之间发生了冲突，就会对实验结果产生较大影响。要避免这一问题，我们可以选择购买“matched pair"的捕获/检测抗体对，这些打包在一起的抗体是商家经过验证才*的好组合。

2. 实验类型

ELISA试剂盒有多种类型，不过它们都有一个共同特点，就是进行抗原捕获。一般捕获形式包括将抗原吸附到微孔板或者用微孔板上的抗体进行捕获。In-cell ELISA和酶联免疫斑点ELISPOT是两种特殊的类型，In-cell ELISA需要将微孔板中培养的细胞进行固定和通透化，然后再用抗体原位检测。ELISPOT有点像蛋白印迹Western blot，先在带膜的微孔板中培养细胞，然后在膜上检测细胞分泌的抗原形成斑点。此外，还需要根据自身需要选择96孔板或是384孔板进行ELISA实验。

通常人们使用双抗夹心法进行ELISA实验，双抗夹心法中抗原被夹在捕获抗体和检测抗体之间，这种方法既灵敏又有效，受到了许多研究者的青睐。不过有时候双抗夹心法并不是通用的选择，例如有时候抗原特别小让两个大抗体难以附着，又或者抗体只有一个抗体结合位点。在上述情况下，竞争性ELISA就更为适用，这种方法是采用带标记的纯化抗原与样本中无标记的抗原进行竞争，以结合捕获抗体。

3. 检测方式

如今检测ELISA有许多途径，我们可以根据自己的偏好进行选择。一般ELISA检测的是酶促反应的可溶性产物，抗体上结合有相应的酶（例如通常使用的辣根过氧化物酶HRP），而反应体系中添加有相应的底物（如3，3-二氨基联苯胺DAB）。这种酶促反应生成具有特征性的颜色，可以通过分光光度计进行检测，碱性磷酸酶AP也是一种常用酶。酶可以结合在一抗上，也可以结合在二抗上，还可以使用链霉亲和素标记的酶与亲和素标记的一抗结合。此外ELISA的结果检测还包括放射性检测、荧光检测、化学发光或显色法检测等。

4. 交叉反应

如果抗体间发生冲突或交叉反应就会影响整个实验的特异性。其中抗体来源所带来的兼容性就是交叉反应的一个因素。尽管现在购买源自动物的抗体越来越容易，我们仍有必要确认一下是否会产生交叉反应的问题。在用双抗夹心法进行ELISA检测时，检测用的二抗必须特异性针对检测一抗，而不能与捕获抗体起反应。如果检测用二抗与捕获抗体结合，实验特异性就会大打折扣。通常我们选用源自不同宿主的捕获抗体和检测一抗，来避免上述问题。与此同时，了解试剂盒中提供的buffer也是有必要的（例如washing buffer和blocking buffer），以免这些buffer含有可能影响抗原抗体相互作用的组分，使检测结果收到影响。