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大鼠磷酸化蛋白激酶C(PPKC)ELISA试剂盒检测程序

1.建立标准曲线：设标准孔8孔，每孔中各加入样品稀释液100ul，*孔加标准品100ul，混匀后用加样器吸出100ul，移至第二孔。如此反复作对倍稀释至第六孔，zui后，从第六孔中吸出100ul弃去。第七孔为空白对照，第八孔为零孔。

2.加样：待测品孔每孔各加入待测样品100ul混匀。

3.将反应板充分混匀后粘上封板纸置37 oC 120分钟。

4.洗板：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

5.每孔(除零孔)加*抗体工作液50ul，置37℃ 60分钟。

6.洗板：操作同4。

7.每孔(除零孔)加酶标抗体工作液100ul(两滴)，将反应板置37 oC 60分钟。

8.洗板：同前。

9.每孔加入底物液A、B各一滴，置37 oC避光反应15分钟。

10.终止：每孔加入1滴终止液混匀。

11.测定：在450nm处测吸光值。

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