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面议β-葡萄糖醛酸苷酶(β-GD)试剂盒50管/48样规格
面议纤维素酶(CL)/羧甲基纤维素酶测试盒100管/48样说明书
面议海藻糖含量测试盒50管/48样说明书
面议蔗糖磷酸化酶测试盒100管/96样说明书
面议支链淀粉含量测试盒100管/96样说明书
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面议琥珀酸脱氢酶(SDH)测试盒50管/48样图片
面议柠檬酸(CA)含量测试盒100管/96样图片
面议羧酸酯酶(CarE)测试盒100管/96样说明书
面议碱性磷酸酶(AKP/ALP)测试盒100管/48样图片
面议乙酰酯酶(AchE)测试盒100管/96样价格
面议公司是*的ATCC细胞供应商,提供水牛皮肤成纤维样细胞;WB-S4的报价,咨询,称技术服务,咨询选购。
细胞名称 水牛皮肤成纤维样细胞;WB-S4
形态特性 成纤维细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞系来源于一雄性河川型水牛的耳部皮肤组织,2010年由中科院昆明细胞库建立。
培养条件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
传代方法 1:2传代;3-4天一次
传代情况 P2
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 荧光法(-)
STR -
同工酶
染色体
使用权限 A类
培养需要满足以下条件
1、无菌、无毒的环境:首先应保证被培养的细胞处于无菌、无毒的环境,即对培养液和所有的培养用具进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素以防培养过程中的污染。
2、营养物质:细胞体外培养所需营养物质与体内基本相同,需要有葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。通常还需加入血清、血浆等一些天然成分。
3、温度和pH:细胞体外培养的适宜温度一般与动物的体温相近。多数细胞生存的适宜pH为7.2~7.4。
4、气体环境:培养所需气体主要有O2和CO2,O2是细胞代谢所必需的,CO2的主要作用是维持培养液的pH。进行细胞培养时,通常采用培养皿或松盖培养瓶,将其置于含95%空气加5% CO2的混合气体的培养箱中进行培养。
操作步骤:
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中,将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片,待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室温孵育爬片20min,使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶,室温孵育15min(一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢),PBS冲洗3次,每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min,PBS冲洗3次,每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育:按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗,滴加在爬片上,于4°C湿盒中孵育一夜,PBS冲洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:选与一抗对应的二抗,按比例稀释后滴加在爬片上,37°C湿盒中孵育30min,PBS冲洗3次,每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干,爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液,显微镜下观察,当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染:用Harris苏木素复染30s~1min,水洗后用1%的盐酸酒精分化,再用蒸馏水(或PBS)水洗返蓝。
10. 封片:将中性树胶滴在爬片一侧,再用盖玻片盖上,先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧,以免产生气泡,封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
ABCD4 cDNA Rat 大鼠 ABCD4 基因全长ORF克隆
RBM47 cDNA Rat 大鼠 RBM47 基因全长ORF克隆
NCAPH2 cDNA Rat 大鼠 NCAPH2 基因全长ORF克隆
SPCS2 cDNA Rat 大鼠 SPCS2 基因全长ORF克隆
SLC25A13 cDNA Rat 大鼠 SLC25A13 基因全长ORF克隆
HBA2 cDNA Rat 大鼠 HBA2 基因全长ORF克隆
CDIP1 cDNA Rat 大鼠 CDIP1 基因全长ORF克隆
UMPS cDNA Rat 大鼠 UMPS 基因全长ORF克隆
CCNB1 cDNA Rat 大鼠 CCNB1 基因全长ORF克隆
FAM45A cDNA Rat 大鼠 FAM45A 基因全长ORF克隆
RGD1306063 cDNA Rat 大鼠 RGD1306063 基因全长ORF克隆
MYOT cDNA Rat 大鼠 MYOT 基因全长ORF克隆
PTBP1 cDNA Rat 大鼠 PTBP1 基因全长ORF克隆
YWHAZ cDNA Rat 大鼠 YWHAZ 基因全长ORF克隆
CPXM1 cDNA Rat 大鼠 CPXM1 基因全长ORF克隆
NCSTN cDNA Rat 大鼠 NCSTN 基因全长ORF克隆
SC5D cDNA Rat 大鼠 SC5D 基因全长ORF克隆
NUCB1 cDNA Rat 大鼠 NUCB1 基因全长ORF克隆
CAPN6 cDNA Rat 大鼠 CAPN6 基因全长ORF克隆
DDX18 cDNA Rat 大鼠 DDX18 基因全长ORF克隆
HSP90AB1 cDNA Rat 大鼠 HSP90AB1 基因全长ORF克隆
SLC35A4 cDNA Rat 大鼠 SLC35A4 基因全长ORF克隆
NARFL cDNA Rat 大鼠 NARFL 基因全长ORF克隆
PITPNB cDNA Rat 大鼠 PITPNB 基因全长ORF克隆
ETFDH cDNA Rat 大鼠 ETFDH 基因全长ORF克隆
ANGPTL2 cDNA Rat 大鼠 ANGPTL2 基因全长ORF克隆
RBM41 cDNA Rat 大鼠 RBM41 基因全长ORF克隆
SRP72 cDNA Rat 大鼠 SRP72 基因全长ORF克隆
MORF4L1 cDNA Rat 大鼠 MORF4L1 基因全长ORF克隆
PPME1 cDNA Rat 大鼠 PPME1 基因全长ORF克隆
ZWINT cDNA Rat 大鼠 ZWINT 基因全长ORF克隆
SERPINA11 cDNA Rat 大鼠 SERPINA11 基因全长ORF克隆
GDPD2 cDNA Rat 大鼠 GDPD2 基因全长ORF克隆
HPX cDNA Rat 大鼠 HPX 基因全长ORF克隆
YIF1A cDNA Rat 大鼠 YIF1A 基因全长ORF克隆
HSD17B2 cDNA Rat 大鼠 HSD17B2 基因全长ORF克隆
LMAN2 cDNA Rat 大鼠 LMAN2 基因全长ORF克隆
EIF3G cDNA Rat 大鼠 EIF3G 基因全长ORF克隆
TCEAL7 cDNA Rat 大鼠 TCEAL7 基因全长ORF克隆
CHMP1B cDNA Rat 大鼠 CHMP1B 基因全长ORF克隆
ARHGAP1 cDNA Rat 大鼠 ARHGAP1 基因全长ORF克隆
CFH cDNA Rat 大鼠 CFH 基因全长ORF克隆
SSR3 cDNA Rat 大鼠 SSR3 基因全长ORF克隆
PPP2R1A cDNA Rat 大鼠 PPP2R1A 基因全长ORF克隆
HSPD1 cDNA Rat 大鼠 HSPD1 基因全长ORF克隆