VH维生素H酶联免疫试剂盒
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2022-03-29 15:58:22
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上海莼试生物技术有限公司

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产品简介

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详细介绍

标本的采集与保存:

1、血清:将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2 小时或4oC 过夜,然后1000×g 离心20 分钟,取上清即

可,或将上清置于-20oC 或-80oC 保存,但应避免反复冻融。

2、血浆:用EDTA 或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的30 分钟内于2-8oC 1000×g 离心15 分钟,

取上清即可检测,或将上清置于-20oC 或-80oC 保存,但应避免反复冻融。

3、组织匀浆:

1) 取适量组织块,于预冷PBS(0.01mol/L, pH 7.0-7.2)中清洗去除血液,称重后备用(组织块较大需先剪碎后再匀浆);

2) 可同时选用多种匀浆方法达到较好的破碎效果:首先将组织块移入玻璃匀浆器,加入5-10mL 预冷PBS 进行充分研磨,该过程需在冰上进行(有条件实验室可选用机器匀浆);得到的匀浆液可再利用超声破碎或反复冻融进一步处理(超声破碎过

我司提供免费代测服务,凡购买我司试剂盒的用户,只收取试剂盒的费用,其他辅助试剂全部免费。我们将根据实验工作量和难易程度,双方协定实验周期,保质保量完成委托实验,并将实验结果和材料用特快专递免费寄送到您手中。

从标本收集、保存、预试验、实验、数据分析等全实验过程提供完整的技术指导。

公司采用的全是进口原材料研,发灵敏性高,高效性,吸附均匀、吸附性好,回收利用率高、可靠性强,无效包退包换,公司提供免费代测服务,各种种属ELISA试剂盒产品齐全,质量可靠。

产品名称

英文名称

货号

VH维生素H酶联免疫试剂盒

VH ELISA Kit

CS-2383E

实验室注意事项:

1、所有试剂不能与皮肤直接接触。

2、务必使用洁净的药勺,量筒或滴管取用试剂,不准用同一种工具同时连续取用多种试剂。

3、取完一种试剂后,应将工具洗净、擦干后,方可取用另一种试剂。

4、试剂取用后一定要将瓶塞盖紧,不可放错瓶盖和滴管,绝不允许张冠李戴,用完后将瓶放回原处。

5、已取出的试剂不能再放回原试剂瓶内。

实验标准品图:

40 ng/L,5号标准品,150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液

20 ng/L,4号标准品,150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液

10 ng/L,3号标准品,150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液

5 ng/L,2号标准品,150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液

2.5 ng/L,1号标准品,150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液

QQ截图20200429162339.jpg 

试剂和样本的控制方法:

一、试剂

1.试剂的选择:国家明确要求要采用批批检定的形式对ELISA试剂严格把关,我司严格按照国家标准进行,已获得国家承认的“三证”,每一个产品都有对应的批号,只要客户提前下单,我们就能为您提供新批次的产品,不必担心会有过期的试剂。我司的试剂,值得您选择。

2.试剂的准备:先将试剂盒先从冰箱中拿出来,在室温下放置20-30 min后,再进行测定,使试剂盒在使用前与室温平衡,这样做的目的能使反应微孔内的温度较快地达到所需的温度,以满足后面的测定需求。

二、样本

1.内源性干扰因素:包括类风湿因子、补体、高浓度的非特异免疫球蛋白、异嗜性抗体、某些自身抗体等;

类风湿因子的控制方法:

①用F(ab)2替代完整的IgG;

②标本用联有热变性IgG的固相吸附剂处理;

③检测抗原时,可用加入到标本稀释液中使RF降解;

补体的控制方法:

①用EDTA稀释标本;

②56℃ 30 min加热血清使C1q灭活;

2.外源性干扰因素:包括标本溶血、细菌污染、保存时间过长或凝固不全等;

控制方法:采血时规范操作,采集的血液勿用力震荡,以防溶血;收集标本时采用无菌试管,经检测后再低温冻存;保存时间不宜过久,检测时尽量采用新鲜标本;对于凝固不全的血标本可适当加入抗凝剂,并放入37℃水中1 h,待充分凝固后再离心分离血清。

操作流程如下:

1)待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。

2)酶标板置4℃,包被过夜。

3)洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去),之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。

4)阴性对照孔每孔加入PBS 50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。

5)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。

6)洗板,同(4)。

7)每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。

8)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。

9)洗板,同(4)。

10)每孔加TMB显色液 100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。

11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。

12)分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最终测得的OD值为两者之差(W1-W2),以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。

13)数据处理:在得出标本(S)和阴性对照(N)的 OD值后,计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。

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