Smart Assembly Cloning kit
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2021-06-07 14:49:20
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上海莼试生物技术有限公司

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产品简介

Smart Assembly Cloning kit是一种简单、快速并且高效的DNA无缝克隆试剂盒,可将插入片段定向克隆至任意载体的任意位点。使用任意方式将载体进行线性化,在插入片段正/反向PCR引物5’端引入线性化载体的末端序列,使得PCR产物5’和3’最末端分别带有和线性化载体两末端一致的序列(25bp -40 bp)。

详细介绍

产品名称:Smart Assembly Cloning kit
2.产品说明
Smart Assembly Cloning Kit 是一种简单、快速并且高效的DNA无缝克隆试剂盒,可将插入片段定向克隆至任意载体的任意位点。使用任意方式将载体进行线性化,在插入片段正/反向PCR引物5’端引入线性化载体的末端序列,使得PCR产物5’和3’最末端分别带有和线性化载体两末端一致的序列(25bp -40 bp)。这种两端带有载体末端序列的PCR产物和线性化载体按一定比例混合后,在重组酶的催化下,50℃反应15 min即可进行转化,完成定向克隆。作为新一代的重组克隆试剂盒,相比同类产品,其核心优势在于专门针对多片段重组反应进行优化,可以一次实现多至12个插入片段的顺序拼接克隆。
 

实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤 
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
      10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1(10pM)               2μl
     引物2(10PM)              2μl
     Taq酶(2U/μl)            1μl
      DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
      加ddH2O至               50 μl
      视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应五要素: 
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。
公司主营产品:
生化试剂:抗生素、维生素、培养基、染色剂、酶/辅酶、碳水化合物、分离试剂、缓冲试剂、核酸及衍生物、氨基酸/蛋白质等其它生化试剂,我们提供各种L-56-41-7品牌。
分子生物学:核酸电泳、DNA Marker、克隆表达、PCR/Q-PCR、RT-PCR、基因组提取、质粒提取、RNA提取、DNA纯化回收、核酸纯化相关试剂。
细胞培养:血清、培养基、平衡盐溶液、辅助添加试剂、细胞检测试验。
蛋白质研究:蛋白电泳、蛋白提取、蛋白纯化、蛋白定量、组织/蛋白染色。
免疫学:抗体、免疫组化、ELISA、免疫印迹WB。

猪粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)免疫试剂盒 phospho-ASK1 (Ser967) 磷酸化细胞凋亡信号调节激酶1抗体
猪粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC)免疫试剂盒 phospho-ASK1 (Thr845) 磷酸化细胞凋亡信号调节激酶1抗体
猪粘蛋白/粘液素2(MUC2)免疫试剂盒 phospho-ATF2 (Thr69/71) 磷酸化活化复制因子2抗体
猪粘蛋白/粘液素1(MUC1)免疫试剂盒 Phospho-ATP1A1 (Tyr10) 磷酸化钠钾ATP酶蛋白a1抗体
猪早老素2(PS-2)免疫试剂盒 Phospho-ATP1A1 (Ser16) 磷酸化钠钾ATP酶蛋白a1抗体
猪早老素1(PS-1)免疫试剂盒 Acetyl CoA Carboxylase 乙酰羧化酶抗体
猪载脂蛋白E(Apo-E)免疫试剂盒 Phospho-Acetyl Coenzyme A carboxylase alpha (Ser78) 磷酸化乙酰羧化酶抗体
猪载脂蛋白B100(apo-B100)免疫试剂盒 Phospho-Ack1 (Tyr859 + 860) 磷酸化Ack1抗体
猪载脂蛋白A5(apo-A5)免疫试剂盒 phospho-AMPK alpha-1(Ser485+Ser491) 磷酸化腺苷单磷酸活化蛋白激酶α1抗体
猪载脂蛋白A1(apo-A1)免疫试剂盒 phospho-AMPK beta 1 (Ser108) 磷酸化腺苷单磷酸活化蛋白激酶β1抗体
猪甾体合成急性调节蛋白(StAR)免疫试剂盒 phospho-ALK (Tyr1604) 磷酸化间变型淋巴瘤激酶抗体
猪孕激素/孕酮(PROG)免疫试剂盒 phospho-ATM(Ser1981) 磷酸化毛细血管扩张性共济失调症突变蛋白抗体
猪诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)免疫试剂盒 phospho-ATP citrate lyase (Ser455) 磷酸化三磷酸腺柠檬酸裂解酶抗体
猪游离脂肪酸(FFA)免疫试剂盒 phospho-ATR (Ser428) 磷酸化ATR抗体
猪游离三碘甲状腺原氨酸(Free-T3)免疫试剂盒 AMN1 细胞核重定位及纺锤体检查点蛋白AMN1抗体
猪游离甲状腺素(FT4)免疫试剂盒 ALG11 天连接糖基化11抗体
猪乙酰受体抗体(AChRab)免疫试剂盒 ASF1A 细胞衰老相关蛋白ASF1A抗体
猪胰高血糖素样肽2(GLP2)免疫试剂盒 AGPHD1 氨基糖苷类磷酸结构域蛋白抗体
猪胰高血糖素样肽1(GLP1)免疫试剂盒 ASGPR1 唾液酸糖蛋白受体1抗体
猪胰高血糖素(GC)免疫试剂盒 ARSF 芳香基硫酸酯酶F抗体
猪胰α2(PAMY α2)免疫试剂盒 AKAP5 A激酶锚定蛋白5抗体
猪胰岛素原(PI)免疫试剂盒 ATXN3L 小脑脊髓共济失调蛋白3抗体
猪胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP-3)免疫试剂盒 ASTE1 ASTE1蛋白抗体
猪胰岛素样生长因子结合蛋白1(IGFBP-1)免疫试剂盒 phospho-APG4B(Ser309) 磷酸化自噬相关蛋白4B抗体
猪胰岛素样生长因子2(IGF-2)免疫试剂盒 AFAP 微丝相关蛋白1抗体
猪胰岛素样生长因子1(IGF-1)免疫试剂盒 ADORA1 腺苷A1A受体抗体
猪胰岛素(INS)免疫试剂盒 ARSB 芳基硫酸酯酶B抗体
猪(Trypsin)免疫试剂盒 ABAT γ氨基丁酸转氨酶抗体
猪一氧化氮(NO)免疫试剂盒 A2BP1 共济失调蛋白2结合蛋白1抗体
猪氧还原蛋白过氧化物酶2(PRDX2)免疫试剂盒 ADAM17 坏死因子α转换酶
猪氧化低密度脂蛋白(OxLDL)免疫试剂盒 ARNT2  芳香烃受体核转录蛋白2抗体
猪血小板衍生生长因子(PDGF)免疫试剂盒 ABH8 AlkB同源蛋白8抗体
猪血小板活化因子(PAF)免疫试剂盒 ABI3BP ABI基因家族成员3结合蛋白抗体
猪血纤蛋白原降解产物(FDP)免疫试剂盒 ARHGAP20 Rho GTP酶激活蛋白20抗体
猪血栓素A2(TXA2)免疫试剂盒 ASB10 含锚蛋白重复序列-细胞因子信号抑制物盒蛋白家族10抗体
猪血栓调节蛋白(TM)免疫试剂盒 ALDH1L1 乙醛脱氢酶1蛋白家族L1抗体
猪血清淀粉样蛋白A(SAA)免疫试剂盒 Axin 2 轴抑制蛋白2抗体
猪血浆(KLKB1)免疫试剂盒 ANGPTL6 血管生成素相关蛋白6抗体
猪血红蛋白(Hb)免疫试剂盒 AMH Muellerian缪勒管激素抑制因子抗体
猪血管性血友病因子/瑞斯托霉素辅因子(VWF)免疫试剂盒 EphA8 蛋白激酶受体A8抗体
猪血管舒缓激肽(BK)免疫试剂盒 Acetoacetyl-CoA synthetase 脂肪酰家族成员1抗体
猪血管生成素2(ANG-2)免疫试剂盒 ARNTL2 芳香烃受体核转录蛋白样2抗体
猪血管生成素1(ANG-1)免疫试剂盒 phospho-AANAT (Thr29) 磷酸化芳香胺N-乙酰化转移酶抗体
猪血管内皮细胞粘附分子1(VCAM-1)免疫试剂盒 ABLIM1 肌动蛋白结合蛋白1抗体
猪血管内皮细胞生长因子(VEGF)免疫试剂盒 AMIGO2 粘附分子IgG样结构域蛋白2抗体
猪血管内皮钙粘着蛋白复合体(VE-cad)免疫试剂盒 Advillin 肌动蛋白结合蛋白DOC6抗体
猪血管紧张素转化酶2(ACE2)免疫试剂盒 AFG3L2 AFG3样蛋白2/脊髓小脑共济失调蛋白28抗体
猪血管紧张素转化酶(ACE)免疫试剂盒 AIP1 激活素受体相互作用蛋白1抗体
猪血管紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)免疫试剂盒 AKR7A2 醛固酮类还原酶家族7成员A2抗体
猪血管活性肠肽(VIP)免疫试剂盒 AKT1+2+3 蛋白激酶AKT1,2,3抗体
猪旋毛虫IgG抗体免疫试剂盒 ATP13A2 帕金森病相关蛋白ATP13A2抗体
猪β4(Thymosin β4)免疫试剂盒 ALS2 肌侧索硬化蛋白2抗体
猪心型脂肪酸结合蛋白(FABP3/FABP11/MDGI)免疫试剂盒 phospho-ATM (Tyr170) 磷酸化毛细血管扩张性共济失调症突变蛋白抗体
猪心钠肽(ANP)免疫试剂盒 ACADL 酰基脱氢酶长链抗体
猪心肌特异性肌钙蛋白T(cTnT)免疫试剂盒 APC5 细胞分裂周期蛋白5抗体
猪心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)免疫试剂盒 beta-Amyloid 1-42(CT) β淀粉样肽/Aβ42抗体
猪酰基去饱和酶(SCD)免疫试剂盒 ADCK4 ADCK4蛋白抗体
猪纤溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)免疫试剂盒 AIMP3 抑癌蛋白AIMP3抗体
Smart Assembly Cloning kit猪纤溶酶原激活物抑制因子(PAI)免疫试剂盒 AKAP associated Sperm Protein 相关蛋白AKAP抗体
猪氧化酶(COX)免疫试剂盒 AKAP6 蛋白激酶A锚定蛋白6抗体
猪还原酶(CCR)免疫试剂盒 ABHD1 肺α/β水解酶蛋白1抗体
猪细胞间粘附分子3(ICAM-3/CD50)免疫试剂盒 ABHD13 水解酶结构域蛋白13抗体
猪细胞间粘附分子2(ICAM-2)免疫试剂盒 ABHD14B 水解酶结构域蛋白14B抗体
猪戊糖素(PE)免疫试剂盒 ABHD15 水解酶结构域蛋白15抗体
猪瘟抗体免疫试剂盒 ABHD3 肺α/β水解酶蛋白3抗体
猪瘟抗体(IgM)免疫试剂盒 ABCF3 三磷酸腺苷结合盒转运蛋白F亚基3抗体
猪瘟抗体(IgG)免疫试剂盒 ABCA5 三磷酸腺苷结合盒转运蛋白A亚基5抗体
猪胃泌酸调节素(OXM)免疫试剂盒 ADCK1 ADCK1蛋白抗体
猪伪狂犬病毒(PRV)抗体(IgG)免疫试剂盒 ACBD4 酰基结合结构域蛋白4抗体
猪(VD)免疫试剂盒 ABHD4 α/β水解酶4抗体
猪褪黑素(MT)免疫试剂盒 ADCK2 ADCK2蛋白抗体
猪透明质酸(HA)免疫试剂盒 ALDH16A1 乙醛脱氢酶16家庭A1抗体
猪铁蛋白(FE)免疫试剂盒 AMIGO3 粘附分子IgG样结构域蛋白3抗体
猪糖化血红蛋白A1c(GHbA1c)免疫试剂盒 AKR1A1 乙醇脱氢酶1抗体
猪胎球蛋白A 免疫试剂盒 ALAD δ氨基乙酰丙酸脱水酶抗体
猪胎盘生长因子(PGF)免疫试剂盒 ALS2CR4 肌侧索硬化症相关蛋白4抗体
猪髓磷脂碱性蛋白(MBP)免疫试剂盒 alpha 2 Macroglobulin α2巨球蛋白(α-2M)抗体
猪髓过氧化物酶(MPO)免疫试剂盒 ACCSL ACCSL蛋白抗体


 

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