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面议【产品名称】:TSLP ??淋巴细胞生成素-1供应
【产品规格】:50ul/0.1ml/0.2ml
【产品价格】:询价(电询或客服.邮件)
【抗体来源】:rat.Rabbit OR Mouse
【产品用途】:科研实验,用于免疫组化实验,WB实验,相应的标记抗体有HRP标记抗体,FITC标记,BIO等。
【性 状】: Lyophilized or Liquid
【浓 度】: 1mg/1ml
【亚 型】: IgG
【贮 存】: 贮存于-20℃.
TSLP ??淋巴细胞生成素-1【相关标记】:HRP Biotin Gold RBITC AP FITC Cy3 Cy5 Cy5.5 Cy7 PE PE-Cy3 PE-CY5 PE-CY5.5 PE-CY7 APC Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 647
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供应 免疫组化问题解答:
1 染色过强
原因 解决方法
a 抗体浓度过高或孵育时间过长 降低抗体滴度、抗体孵育时间:室温1小时或4度过夜
b 孵育温度过高超过37度 一般在室温20-28度
c DAB显色时间过长或浓度过高 显色时间不超过5-12分钟,以显微镜下观察为准
2 非特异性背景染色
原因 解决方法
a 操作过程中冲洗不充分 每步冲洗3次每次5分钟
b 组织中含过氧化物酶未阻断 可再配置新鲜3%H2O2封闭孵育时间延长
c 组织中含内原性* 正常非免疫动物血清再封闭
d 血清蛋白封闭不充分 延长血清蛋白封闭时间
3 染色弱
原因 解决方法
a 抗体浓度过低、孵育时间过短 提高抗体浓度、孵育时间不能少 于60分钟
b 试剂超过有效使用时间 应更换试剂
c 操作中添加试剂时缓冲液未沥干 每步滴加试剂前沥干切片中多余的缓冲液
使试剂稀释 (应防止切片干燥)
d 室温太低 低于15度 要改放在37度孵育箱孵育30-60分钟或4 度冰箱过夜
e 蛋白封闭过度 封闭不要超过12分钟
4 染色阴性
原因 解决方法
a 操作步骤错误 应重试 设阳性对照
b 组织中无抗原 设阳性对照以验证试验结果
c 一抗与二抗种属连接错误 仔细确定一抗二抗种属无误。
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1. 固定液的量
固定组织时必须有足够的固定液,一般为组织块体积的10~15倍。固定用的容器必须足够大,组织材料不要太多,避免组织中的水分渗出而影响固定液的浓度。
2.固定的组织必须新鲜
组织取材后应立即固定。特别是在夏季,标本不及时固定,组织易收缩变形,并发生自溶现象。一般组织在离体30分钟内固定。
3.组织块的体积
组织块的体积宜小而薄,一般用于免疫组化的组织大小宜为1.0cmX1.0cmX0.2cm。组织太大,内部得不到充分固定,导致组织结构破坏,给切片带来一定的困难,还增加非特异染色,同时浪费试剂。
4.固定时间
固定时间要视组织块大小及固定液的种类、浓度、温度而定。组织块越大,固定时间越长;反之,组织块越小,固定时间越短。固定液的穿透力与浓度成正比,固定的时间与温度成反比。总之,固定的时间应根据条件而定。
5. 组织固定后的冲洗
组织固定后,因固定液渗到组织中,所以必须*冲洗,除去固定液,否则会影响下一步的脱水。特别对于长时间固定的标本应用流水冲洗,尽可能减少色素沉着。对于混合固定液固定的组织,更要及时冲洗,否则将影响免疫组化切片的质量。